ਕੇਂਦ੍ਰਿਤ ਜੈੱਲ ਅਤੇ ਵਿਭਾਜਨ ਜੈੱਲ ਵਿਚਕਾਰ ਅੰਤਰ
ਕੇਂਦਰਿਤ ਜੈੱਲ ਦਾ pH ਮੁੱਲ ਵਿਭਾਜਨ ਜੈੱਲ ਨਾਲੋਂ ਵੱਖਰਾ ਹੈ।ਪਹਿਲਾ ਮੁੱਖ ਤੌਰ 'ਤੇ ਇਕਾਗਰਤਾ ਪ੍ਰਭਾਵ ਦਿਖਾਉਂਦਾ ਹੈ, ਜਦੋਂ ਕਿ ਬਾਅਦ ਵਾਲਾ ਚਾਰਜ ਪ੍ਰਭਾਵ ਅਤੇ ਅਣੂ ਸਿਵੀ ਪ੍ਰਭਾਵ ਦਿਖਾਉਂਦਾ ਹੈ।ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਪ੍ਰਭਾਵ ਮੁੱਖ ਤੌਰ 'ਤੇ ਕੇਂਦਰਿਤ ਜੈੱਲ ਵਿੱਚ ਪੂਰਾ ਹੁੰਦਾ ਹੈ.ਕੇਂਦਰਿਤ ਜੈੱਲ ਦਾ pH 6.8 ਹੈ।ਇਸ pH ਸਥਿਤੀ ਦੇ ਤਹਿਤ, ਬਫਰ ਵਿੱਚ HCl ਦੇ ਲਗਭਗ ਸਾਰੇ Cl ਆਇਨਾਂ ਨੂੰ ਵੱਖ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਗਲਾਈ ਦਾ ਆਈਸੋਇਲੈਕਟ੍ਰਿਕ ਪੁਆਇੰਟ 6.0 ਹੁੰਦਾ ਹੈ।ਸਿਰਫ ਕੁਝ ਕੁ ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਆਇਨਾਂ ਵਿੱਚ ਵੰਡੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ, ਜੋ ਇਲੈਕਟ੍ਰਿਕ ਫੀਲਡ ਵਿੱਚ ਬਹੁਤ ਹੌਲੀ ਹੌਲੀ ਚਲਦੇ ਹਨ।ਐਸਿਡਿਕ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਇਸ pH 'ਤੇ ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਆਇਨਾਂ ਵਿੱਚ ਵੰਡੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ, ਅਤੇ ਤਿੰਨ ਕਿਸਮਾਂ ਦੇ ਆਇਨਾਂ ਦੀ ਮਾਈਗ੍ਰੇਸ਼ਨ ਦਰ cl > ਜਨਰਲ ਪ੍ਰੋਟੀਨ > ਗਲਾਈ ਹੈ।ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਸ਼ੁਰੂ ਹੋਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, Cl ਆਇਨ ਤੇਜ਼ੀ ਨਾਲ ਅੱਗੇ ਵਧਦੇ ਹਨ, ਇੱਕ ਘੱਟ ਆਇਨ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਖੇਤਰ ਨੂੰ ਪਿੱਛੇ ਛੱਡਦੇ ਹਨ।ਗਲਾਈ ਇਲੈਕਟ੍ਰਿਕ ਫੀਲਡ ਵਿੱਚ ਬਹੁਤ ਹੌਲੀ ਹੌਲੀ ਚਲਦੀ ਹੈ, ਜਿਸਦੇ ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ ਗਤੀਸ਼ੀਲ ਆਇਨਾਂ ਦੀ ਘਾਟ ਹੁੰਦੀ ਹੈ, ਇਸਲਈ ਤੇਜ਼ ਅਤੇ ਹੌਲੀ ਆਇਨਾਂ ਦੇ ਵਿਚਕਾਰ ਇੱਕ ਉੱਚ-ਵੋਲਟੇਜ ਖੇਤਰ ਵਿੱਚ ਆਇਨਾਂ ਦੀ ਘਾਟ ਹੁੰਦੀ ਹੈ।ਉੱਚ-ਵੋਲਟੇਜ ਖੇਤਰ ਵਿੱਚ ਸਾਰੇ ਨੈਗੇਟਿਵ ਆਇਨ ਆਪਣੀ ਗਤੀ ਨੂੰ ਤੇਜ਼ ਕਰਨਗੇ।ਜਦੋਂ ਉਹ Cl ਆਇਨ ਖੇਤਰ ਵਿੱਚ ਚਲੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ, ਤਾਂ ਉੱਚ ਵੋਲਟੇਜ ਗਾਇਬ ਹੋ ਜਾਂਦੀ ਹੈ, ਅਤੇ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਦੀ ਗਤੀ ਹੌਲੀ ਹੋ ਜਾਂਦੀ ਹੈ।ਉਪਰੋਕਤ ਸਥਿਰ ਅਵਸਥਾ ਸਥਾਪਤ ਹੋਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਦਾ ਨਮੂਨਾ ਇੱਕ ਤੰਗ ਅੰਤਰ ਪਰਤ ਬਣਾਉਣ ਲਈ ਤੇਜ਼ ਅਤੇ ਹੌਲੀ ਆਇਨਾਂ ਦੇ ਵਿਚਕਾਰ ਕੇਂਦਰਿਤ ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ਇਸ ਨੂੰ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਦੁਆਰਾ ਕੀਤੇ ਗਏ ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਚਾਰਜ ਦੀ ਮਾਤਰਾ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ ਬੈਂਡਾਂ ਵਿੱਚ ਵਿਵਸਥਿਤ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।ਕੇਂਦ੍ਰਿਤ ਨਮੂਨੇ ਦੇ ਕੇਂਦਰਿਤ ਜੈੱਲ ਤੋਂ ਵੱਖ ਹੋਣ ਵਾਲੇ ਜੈੱਲ ਵਿੱਚ ਦਾਖਲ ਹੋਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਜੈੱਲ ਦਾ pH ਵੱਧਦਾ ਹੈ, ਗਲਾਈ ਦੀ ਵੰਡ ਦੀ ਡਿਗਰੀ ਵਧਦੀ ਹੈ, ਅਤੇ ਗਤੀਸ਼ੀਲਤਾ ਵਧਦੀ ਹੈ।ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਕਿਉਂਕਿ ਇਸਦਾ ਅਣੂ ਛੋਟਾ ਹੈ, ਇਹ ਸਾਰੇ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਅਣੂਆਂ ਤੋਂ ਵੱਧ ਹੈ।Cl ਆਇਨਾਂ ਦੇ ਮਾਈਗ੍ਰੇਟ ਹੋਣ ਤੋਂ ਤੁਰੰਤ ਬਾਅਦ, ਘੱਟ ਆਇਨ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਹੁਣ ਮੌਜੂਦ ਨਹੀਂ ਰਹਿੰਦੀ, ਇੱਕ ਸਥਿਰ ਇਲੈਕਟ੍ਰਿਕ ਫੀਲਡ ਤਾਕਤ ਬਣਾਉਂਦੀ ਹੈ।ਇਸ ਲਈ, ਵਿਭਾਜਨ ਜੈੱਲ ਵਿੱਚ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਦਾ ਵੱਖ ਹੋਣਾ ਮੁੱਖ ਤੌਰ 'ਤੇ ਇਸਦੇ ਚਾਰਜ ਗੁਣਾਂ, ਅਣੂ ਦੇ ਆਕਾਰ ਅਤੇ ਆਕਾਰ 'ਤੇ ਨਿਰਭਰ ਕਰਦਾ ਹੈ।ਵਿਭਾਜਨ ਜੈੱਲ ਦੇ ਪੋਰ ਦਾ ਆਕਾਰ ਇੱਕ ਖਾਸ ਆਕਾਰ ਹੁੰਦਾ ਹੈ.ਵੱਖੋ-ਵੱਖਰੇ ਰਿਸ਼ਤੇਦਾਰ ਪੁੰਜ ਵਾਲੇ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਲਈ, ਲੰਘਣ ਵੇਲੇ ਪ੍ਰਾਪਤ ਹਿਸਟਰੇਸਿਸ ਪ੍ਰਭਾਵ ਵੱਖਰਾ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।ਬਰਾਬਰ ਸਥਿਰ ਚਾਰਜ ਵਾਲੇ ਕਣ ਵੀ ਇਸ ਅਣੂ ਦੀ ਛੱਲੀ ਦੇ ਪ੍ਰਭਾਵ ਕਾਰਨ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਆਕਾਰਾਂ ਦੇ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਨੂੰ ਇੱਕ ਦੂਜੇ ਤੋਂ ਵੱਖ ਕਰ ਦੇਣਗੇ।
ਵੱਖ ਕਰਨ ਵਾਲੇ ਗੂੰਦ ਦੇ 10% ਅਤੇ 12% ਵਿਚਕਾਰ ਅੰਤਰ
ਤੁਹਾਡੇ ਟੀਚੇ ਵਾਲੇ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਦੇ ਅਣੂ ਭਾਰ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ, ਜੇਕਰ ਇਹ ਇੱਕ ਵੱਡੇ ਅਣੂ ਭਾਰ (60KD ਤੋਂ ਉੱਪਰ) ਵਾਲਾ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਹੈ, ਤਾਂ ਤੁਸੀਂ 10% ਗੂੰਦ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰ ਸਕਦੇ ਹੋ, ਜੇਕਰ ਇਹ 60 ਅਤੇ 30kd ਦੇ ਵਿਚਕਾਰ ਇੱਕ ਅਣੂ ਭਾਰ ਵਾਲਾ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਹੈ, ਤਾਂ ਤੁਸੀਂ 12 ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰ ਸਕਦੇ ਹੋ। % ਗੂੰਦ, ਅਤੇ ਜੇਕਰ ਇਹ 30kd ਤੋਂ ਘੱਟ ਹੈ, ਤਾਂ ਮੈਂ ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ 15% ਗੂੰਦ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦਾ ਹਾਂ।ਮੁੱਖ ਬਿੰਦੂ ਇਹ ਹੈ ਕਿ ਜਦੋਂ ਸੂਚਕ ਲਾਈਨ ਰਬੜ ਦੇ ਤਲ ਤੋਂ ਬਾਹਰ ਚਲੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ, ਤਾਂ ਤੁਹਾਡਾ ਟੀਚਾ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਰਬੜ ਦੇ ਮੱਧ ਵਿੱਚ ਹੋ ਸਕਦਾ ਹੈ।
ਜੈੱਲ ਦੀ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰੀ ਜੈੱਲ ਦੇ ਪੋਰ ਦਾ ਆਕਾਰ ਵੀ ਵੱਖਰਾ ਹੈ।ਛੋਟੀ ਇਕਾਗਰਤਾ ਦੇ ਨਾਲ ਪੋਰ ਦਾ ਆਕਾਰ ਵੱਡਾ ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਵੱਡੀ ਇਕਾਗਰਤਾ ਦੇ ਨਾਲ ਪੋਰ ਦਾ ਆਕਾਰ ਛੋਟਾ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ, ਵਿਭਾਜਨ ਜੈੱਲ 12% ਹੁੰਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਕੇਂਦਰਿਤ ਜੈੱਲ 5% ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ਕਿਉਂਕਿ ਕੇਂਦਰਿਤ ਜੈੱਲ ਦਾ ਉਦੇਸ਼ ਸਾਰੇ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਨੂੰ ਇੱਕੋ ਸ਼ੁਰੂਆਤੀ ਲਾਈਨ 'ਤੇ ਕੇਂਦਰਿਤ ਕਰਨਾ ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਫਿਰ ਵਿਭਾਜਨ ਜੈੱਲ ਨੂੰ ਵੱਖ ਕਰਨ ਲਈ ਦਾਖਲ ਕਰਨਾ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਦੇ ਆਕਾਰ 'ਤੇ ਨਿਰਭਰ ਕਰਦਾ ਹੈ.
ਪੋਸਟ ਟਾਈਮ: ਸਤੰਬਰ-05-2022
