സാന്ദ്രീകൃത ജെല്ലും വേർതിരിക്കൽ ജെല്ലും തമ്മിലുള്ള വ്യത്യാസം

സാന്ദ്രീകൃത ജെല്ലും വേർതിരിക്കൽ ജെല്ലും തമ്മിലുള്ള വ്യത്യാസം

സാന്ദ്രീകൃത ജെല്ലിന്റെ പിഎച്ച് മൂല്യം വേർതിരിക്കുന്ന ജെല്ലിൽ നിന്ന് വ്യത്യസ്തമാണ്.ആദ്യത്തേത് പ്രധാനമായും കോൺസൺട്രേഷൻ പ്രഭാവം കാണിക്കുന്നു, രണ്ടാമത്തേത് ചാർജ് ഇഫക്റ്റും മോളിക്യുലാർ സീവ് ഇഫക്റ്റും കാണിക്കുന്നു.ഏകാഗ്രത പ്രഭാവം പ്രധാനമായും സാന്ദ്രീകൃത ജെല്ലിൽ പൂർത്തീകരിക്കപ്പെടുന്നു.സാന്ദ്രീകൃത ജെല്ലിന്റെ പിഎച്ച് 6.8 ആണ്.ഈ pH അവസ്ഥയിൽ, ബഫറിലെ HCl ന്റെ മിക്കവാറും എല്ലാ Cl അയോണുകളും വിഘടിപ്പിക്കപ്പെടുന്നു, കൂടാതെ Gly യുടെ ഐസോഇലക്‌ട്രിക് പോയിന്റ് 6.0 ആണ്.വൈദ്യുത മണ്ഡലത്തിൽ വളരെ സാവധാനത്തിൽ നീങ്ങുന്ന നെഗറ്റീവ് അയോണുകളായി ചുരുക്കം ചിലത് മാത്രം വിഘടിപ്പിക്കപ്പെടുന്നു.ഈ pH-ൽ അസിഡിക് പ്രോട്ടീനുകൾ നെഗറ്റീവ് അയോണുകളായി വിഘടിപ്പിക്കപ്പെടുന്നു, കൂടാതെ മൂന്ന് തരം അയോണുകളുടെ മൈഗ്രേഷൻ നിരക്ക് cl > General proteins > Gly ആണ്.ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് ആരംഭിച്ചതിനുശേഷം, Cl അയോണുകൾ വേഗത്തിൽ നീങ്ങുന്നു, കുറഞ്ഞ അയോൺ സാന്ദ്രതയുള്ള പ്രദേശം പിന്നിൽ അവശേഷിക്കുന്നു.വൈദ്യുത മണ്ഡലത്തിൽ Gly വളരെ സാവധാനത്തിൽ നീങ്ങുന്നു, ചലിക്കുന്ന അയോണുകളുടെ അഭാവത്തിന് കാരണമാകുന്നു, അതിനാൽ വേഗതയേറിയതും വേഗത കുറഞ്ഞതുമായ അയോണുകൾക്കിടയിൽ അയോണുകൾ ഇല്ലാത്ത ഒരു ഉയർന്ന വോൾട്ടേജ് പ്രദേശം രൂപം കൊള്ളുന്നു.ഉയർന്ന വോൾട്ടേജ് മേഖലയിലെ എല്ലാ നെഗറ്റീവ് അയോണുകളും അവയുടെ ചലനത്തെ ത്വരിതപ്പെടുത്തും.അവ Cl ion മേഖലയിലേക്ക് നീങ്ങുമ്പോൾ, ഉയർന്ന വോൾട്ടേജ് അപ്രത്യക്ഷമാകുന്നു, പ്രോട്ടീന്റെ ചലിക്കുന്ന വേഗത കുറയുന്നു.മേൽപ്പറഞ്ഞ സ്ഥിരത സ്ഥാപിച്ച ശേഷം, പ്രോട്ടീൻ സാമ്പിൾ വേഗതയേറിയതും വേഗത കുറഞ്ഞതുമായ അയോണുകൾക്കിടയിൽ കേന്ദ്രീകരിച്ച് ഒരു ഇടുങ്ങിയ ഇന്റർലേയർ രൂപപ്പെടുത്തുന്നു, പ്രോട്ടീൻ വഹിക്കുന്ന നെഗറ്റീവ് ചാർജിന്റെ അളവ് അനുസരിച്ച് ഇത് ബാൻഡുകളായി ക്രമീകരിച്ചിരിക്കുന്നു.സാന്ദ്രീകൃത സാമ്പിൾ സാന്ദ്രീകൃത ജെല്ലിൽ നിന്ന് വേർതിരിക്കൽ ജെല്ലിലേക്ക് പ്രവേശിച്ച ശേഷം, ജെലിന്റെ പിഎച്ച് ഉയരുന്നു, ഗ്ലൈയുടെ ഡിസോസിയേഷൻ ഡിഗ്രി വർദ്ധിക്കുന്നു, ചലനാത്മകത ഉയരുന്നു.മാത്രമല്ല, അതിന്റെ തന്മാത്ര ചെറുതായതിനാൽ, അത് എല്ലാ പ്രോട്ടീൻ തന്മാത്രകളെയും കവിയുന്നു.Cl അയോണുകൾ മൈഗ്രേറ്റ് ചെയ്‌തതിന് തൊട്ടുപിന്നാലെ, കുറഞ്ഞ അയോൺ സാന്ദ്രത നിലവിലില്ല, ഇത് സ്ഥിരമായ വൈദ്യുത മണ്ഡല ശക്തിയായി മാറുന്നു.അതിനാൽ, സെപ്പറേഷൻ ജെല്ലിലെ പ്രോട്ടീൻ സാമ്പിളുകളുടെ വേർതിരിവ് പ്രധാനമായും അതിന്റെ ചാർജ് പ്രോപ്പർട്ടികൾ, തന്മാത്രാ വലിപ്പം, ആകൃതി എന്നിവയെ ആശ്രയിച്ചിരിക്കുന്നു.വേർതിരിക്കൽ ജെല്ലിന്റെ സുഷിര വലുപ്പത്തിന് ഒരു നിശ്ചിത വലുപ്പമുണ്ട്.വ്യത്യസ്ത ആപേക്ഷിക പിണ്ഡമുള്ള പ്രോട്ടീനുകൾക്ക്, കടന്നുപോകുമ്പോൾ ലഭിക്കുന്ന ഹിസ്റ്റെറിസിസ് പ്രഭാവം വ്യത്യസ്തമാണ്.തുല്യ സ്റ്റാറ്റിക് ചാർജുകളുള്ള കണികകൾ പോലും ഈ തന്മാത്രാ അരിപ്പയുടെ പ്രഭാവം കാരണം വ്യത്യസ്ത വലുപ്പത്തിലുള്ള പ്രോട്ടീനുകളെ പരസ്പരം വേർതിരിക്കും.