केन्द्रित जेल र विभाजन जेल बीचको भिन्नता

केन्द्रित जेल र विभाजन जेल बीचको भिन्नता

केन्द्रित जेलको pH मान विभाजन जेलको भन्दा फरक छ।पहिलोले मुख्यतया एकाग्रता प्रभाव देखाउँछ, जबकि पछिल्लोले चार्ज प्रभाव र आणविक चलनी प्रभाव देखाउँछ।एकाग्रता प्रभाव मुख्यतया केन्द्रित जेल मा पूरा हुन्छ।केन्द्रित जेलको pH 6.8 छ।यस pH अवस्था अन्तर्गत, बफरमा HCl को लगभग सबै Cl आयनहरू अलग छन्, र Gly को आइसोइलेक्ट्रिक बिन्दु 6.0 छ।केवल केहि नकारात्मक आयनहरूमा पृथक हुन्छन्, जुन बिजुली क्षेत्रमा धेरै बिस्तारै सर्छ।एसिडिक प्रोटीनहरू यस pH मा नकारात्मक आयनहरूमा विभाजित हुन्छन्, र तीन प्रकारका आयनहरूको माइग्रेसन दर cl > सामान्य प्रोटीन > Gly हो।इलेक्ट्रोफोरेसिस सुरु भएपछि, Cl आयनहरू छिटो सर्छ, कम आयन एकाग्रता क्षेत्र पछाडि छोड्छ।Gly बिजुली क्षेत्रमा धेरै बिस्तारै चल्छ, जसको परिणामस्वरूप चल्ने आयनहरूको कमी हुन्छ, त्यसैले छिटो र ढिलो आयनहरू बीच आयनहरूको अभाव भएको उच्च-भोल्टेज क्षेत्र बनाइन्छ।उच्च भोल्टेज क्षेत्रमा सबै नकारात्मक आयनहरूले तिनीहरूको आन्दोलनलाई गति दिनेछ।जब तिनीहरू Cl आयन क्षेत्रमा सर्छन्, उच्च भोल्टेज गायब हुन्छ, र प्रोटीनको गतिशील गति सुस्त हुन्छ।माथिको स्थिर अवस्था स्थापित भएपछि, प्रोटिन नमूना द्रुत र ढिलो आयनहरू बीच साँघुरो इन्टरलेयर बनाउनको लागि केन्द्रित हुन्छ, यसलाई प्रोटिनले बोक्ने नकारात्मक चार्जको मात्रा अनुसार ब्यान्डहरूमा व्यवस्थित गरिन्छ।केन्द्रित नमूनाले केन्द्रित जेलबाट विभाजन जेलमा प्रवेश गरेपछि, जेलको pH बढ्छ, Gly को पृथक्करण डिग्री बढ्छ, र गतिशीलता बढ्छ।यसबाहेक, किनभने यसको अणु सानो छ, यसले सबै प्रोटीन अणुहरू भन्दा बढी छ।Cl आयनहरू माइग्रेट भएपछि तुरुन्तै, कम आयन एकाग्रता अब अवस्थित हुँदैन, एक स्थिर विद्युतीय क्षेत्र बल बनाउँछ।त्यसकारण, विभाजन जेलमा प्रोटीन नमूनाहरूको विभाजन मुख्यतया यसको चार्ज गुणहरू, आणविक आकार र आकारमा निर्भर गर्दछ।विभाजन जेल को छिद्र आकार एक निश्चित आकार छ।बिभिन्न सापेक्षिक द्रव्यमान भएका प्रोटिनहरूको लागि, हिस्टेरेसिसको प्रभाव उत्तीर्ण हुँदा फरक हुन्छ।समान स्थिर चार्ज भएका कणहरूले पनि यो आणविक छलनीको प्रभावको कारणले विभिन्न आकारका प्रोटीनहरूलाई एकअर्काबाट अलग गर्नेछन्।