Dallimi midis xhelit të koncentruar dhe xhelit ndarës
Vlera e pH e xhelit të koncentruar është e ndryshme nga ajo e xhelit ndarës.E para tregon kryesisht efekt përqendrimi, ndërsa e dyta tregon efektin e ngarkesës dhe efektin e sitës molekulare.Efekti i përqendrimit përfundon kryesisht në xhel të koncentruar.PH e xhelit të koncentruar është 6.8.Në këtë gjendje pH, pothuajse të gjithë jonet Cl të HCl në tampon janë të disociuar, dhe pika izoelektrike e Gly është 6.0.Vetëm disa prej tyre shpërndahen në jone negative, të cilat lëvizin shumë ngadalë në fushën elektrike.Proteinat acidike shpërndahen në jone negative në këtë pH dhe shkalla e migrimit të tre llojeve të joneve është cl > Proteinat e përgjithshme > Gly.Pas fillimit të elektroforezës, jonet Cl lëvizin shpejt, duke lënë pas një zonë të përqendrimit të ulët të joneve.Gly lëviz shumë ngadalë në fushën elektrike, duke rezultuar në mungesë të joneve lëvizëse, kështu që një rajon i tensionit të lartë ku mungojnë jonet formohet midis joneve të shpejta dhe të ngadalta.Të gjithë jonet negative në rajonin e tensionit të lartë do të përshpejtojnë lëvizjen e tyre.Kur ato lëvizin në rajonin e joneve Cl, voltazhi i lartë zhduket dhe shpejtësia e lëvizjes së proteinës ngadalësohet.Pasi të krijohet gjendja e mësipërme e qëndrueshme, kampioni i proteinës përqendrohet midis joneve të shpejta dhe të ngadalta për të formuar një shtresë të ngushtë të ngushtë, ajo renditet në breza sipas sasisë së ngarkesës negative që bartet nga proteina.Pasi kampioni i koncentruar hyn në xhelin e ndarjes nga xheli i koncentruar, pH i xhelit rritet, shkalla e disociimit të Gly rritet dhe lëvizshmëria rritet.Për më tepër, për shkak se molekula e saj është e vogël, ajo tejkalon të gjitha molekulat e proteinave.Menjëherë pas migrimit të joneve të Cl, përqendrimi i ulët i joneve nuk ekziston më, duke formuar një forcë konstante të fushës elektrike.Prandaj, ndarja e mostrave të proteinave në xhelin ndarës varet kryesisht nga vetitë e ngarkesës, madhësia molekulare dhe forma.Madhësia e poreve të xhelit ndarës ka një madhësi të caktuar.Për proteinat me masë të ndryshme relative, efekti i histerezës që merret kur kalohet është i ndryshëm.Edhe grimcat me ngarkesa statike të barabarta do të ndajnë proteinat me madhësi të ndryshme nga njëra-tjetra për shkak të efektit të kësaj sitë molekulare.
Dallimi midis 10% dhe 12% të ngjitësit ndarës
Sipas peshës molekulare të proteinës suaj të synuar, nëse është një proteinë me peshë molekulare më të madhe (mbi 60 KD), mund të përdorni 10% ngjitës, nëse është një proteinë me peshë molekulare midis 60 dhe 30 kd, mund të përdorni 12 % zam, dhe nëse është më i ulët se 30kd, zakonisht përdor ngjitës 15%.Çështja kryesore është se kur vija treguese mbaron nga fundi i gomës, proteina juaj e synuar mund të jetë vetëm në mes të gomës.
Madhësia e poreve të xhelit që korrespondon me përqendrime të ndryshme të xhelit është gjithashtu e ndryshme.Madhësia e poreve me përqendrim të vogël është e madhe, dhe madhësia e poreve me përqendrim të madh është e vogël.Në përgjithësi, xheli i ndarjes është 12% dhe xheli i koncentruar është 5%, sepse qëllimi i xhelit të koncentruar është të përqendrojë të gjitha proteinat në të njëjtën linjë fillestare dhe më pas të futet në xhelin e ndarjes për ndarje.Në varësi të madhësisë së proteinës.
Koha e postimit: 05-05-2022
