Differenza trà gel concentratu è gel di separazione
U valore di pH di u gel cuncentratu hè diversu da quellu di u gel di separazione.U primu mostra principarmenti l'effettu di cuncentrazione, mentre chì l'ultimu mostra l'effettu di carica è l'effettu di u crivellu moleculare.L'effettu di cuncentrazione hè principalmente cumpletu in u gel cuncentratu.U pH di u gel cuncentratu hè 6,8.Sutta sta cundizione di pH, quasi tutti l'ioni Cl di HCl in u buffer sò dissociati, è u puntu isoelettricu di Gly hè 6.0.Solu uni pochi sò dissociati in ioni negativi, chì si movenu assai lentamente in u campu elettricu.I proteini acidi sò dissociati in ioni negativi à questu pH, è a rata di migrazione di i trè tippi di ioni hè cl> Proteine generale> Gly.Dopu chì l'elettroforesi principia, i ioni Cl si movenu rapidamente, lascendu una zona di cuncentrazione di ioni bassu.Gly si move assai pianu in u campu elettricu, risultatu in a mancanza di ioni in muvimentu, cusì una regione d'alta tensione chì manca di ioni hè furmatu trà ioni veloci è lenti.Tutti i ioni negativi in a regione d'alta tensione accelerà u so muvimentu.Quandu si movenu à a regione di ioni Cl, l'alta tensione sparisce, è a velocità di muvimentu di a proteina rallenta.Dopu chì u statu stabile sopra hè stabilitu, a mostra di a proteina hè cuncentrata trà ioni veloci è lenti per furmà un interlayer strettu, hè dispostu in bande secondu a quantità di carica negativa purtata da a proteina.Dopu chì a mostra cuncentrata entra in u gel di separazione da u gel cuncentratu, u pH di u gel aumenta, u gradu di dissociazione di Gly aumenta, è a mobilità aumenta.Inoltre, perchè a so molécula hè chjuca, supera tutte e molécule di prutezione.Immediatamente dopu a migrazione di l'ioni Cl, a concentrazione di ioni bassu ùn esiste più, furmendu una forza di campu elettricu constante.Dunque, a separazione di i campioni di proteine in u gel di separazione dipende principalmente da e so proprietà di carica, dimensioni molecolari è forma.A dimensione di i pori di u gel di separazione hà una certa dimensione.Per i proteini cù una massa relativa differente, l'effettu di l'isteresi ricivutu quandu u passa hè diversu.Ancu particeddi cù carichi statici uguali separà e proteine di diverse dimensioni l'una di l'altru per via di l'effettu di stu crivellu moleculare.
Differenza trà 10% è 12% di a cola di separazione
Sicondu u pesu molekulari di a vostra proteina di destinazione, s'ellu hè una proteina cù un pesu moleculare più grande (sopra 60KD), pudete aduprà 10% cola, s'ellu hè una proteina cù un pesu moleculare trà 60 è 30kd, pudete aduprà 12. % cola, è s'ellu hè più bassu di 30kd, di solitu aduprà 15% cola.U puntu principalu hè chì quandu a linea di l'indicatore hè ghjustu fora di u fondu di gomma, a vostra proteina di destinazione pò esse ghjustu à mezu à a gomma.
A dimensione di i pori di gel chì currisponde à diverse cuncentrazioni di gel hè ancu diversu.A dimensione di poru cù una piccula cuncentrazione hè grande, è a dimensione di poru cù una grande cuncentrazione hè chjuca.In generale, u gelu di separazione hè di 12% è u gelu cuncentratu hè di 5%, perchè u scopu di u gelu cuncentratu hè di cuncentrazione di tutte e proteine in a listessa linea di partenza, è dopu entre in u gel di separazione per a separazione.Sicondu a dimensione di a proteina.
Tempu di Postu: Set-05-2022
