Tofauti kati ya gel iliyojilimbikizia na gel ya kujitenga
Thamani ya pH ya gel iliyojilimbikizia ni tofauti na ile ya gel ya kujitenga.Ya kwanza inaonyesha athari ya ukolezi, wakati ya mwisho inaonyesha athari ya malipo na athari ya ungo wa Masi.Athari ya mkusanyiko imekamilika hasa katika gel iliyojilimbikizia.pH ya gel iliyojilimbikizia ni 6.8.Chini ya hali hii ya pH, karibu ioni zote za Cl za HCl kwenye bafa zimetenganishwa, na sehemu ya isoelectric ya Gly ni 6.0.Wachache tu wamejitenga katika ions hasi, ambayo huenda polepole sana kwenye uwanja wa umeme.Protini zenye asidi hutenganishwa na kuwa ayoni hasi katika pH hii, na kasi ya uhamaji ya aina tatu za ayoni ni cl > Protini za jumla > Gly.Baada ya electrophoresis kuanza, ioni za Cl husonga haraka, na kuacha eneo la mkusanyiko wa ioni chini.Gly huenda polepole sana kwenye uwanja wa umeme, na kusababisha ukosefu wa ioni za kusonga, hivyo eneo la high-voltage isiyo na ions huundwa kati ya ioni za haraka na za polepole.Ions zote hasi katika eneo la high-voltage zitaharakisha harakati zao.Wanapohamia eneo la Cl ion, voltage ya juu hupotea, na kasi ya kusonga ya protini hupungua.Baada ya hali ya juu imara kuanzishwa, sampuli ya protini imejilimbikizia kati ya ioni za haraka na za polepole ili kuunda interlayer nyembamba, Imepangwa kwa bendi kulingana na kiasi cha malipo hasi yanayobebwa na protini.Baada ya sampuli iliyojilimbikizia inaingia kwenye gel ya kujitenga kutoka kwa gel iliyojilimbikizia, pH ya gel inaongezeka, kiwango cha kujitenga cha Gly kinaongezeka, na uhamaji huongezeka.Aidha, kwa sababu molekuli yake ni ndogo, inazidi molekuli zote za protini.Mara tu baada ya ioni za Cl kuhama, ukolezi wa chini wa ioni haupo tena, na kutengeneza nguvu ya uwanja wa umeme mara kwa mara.Kwa hiyo, mgawanyo wa sampuli za protini katika gel ya kujitenga inategemea mali yake ya malipo, ukubwa wa Masi na sura.Ukubwa wa pore ya gel ya kujitenga ina ukubwa fulani.Kwa protini zilizo na misa tofauti ya jamaa, athari ya hysteresis iliyopokelewa wakati wa kupita ni tofauti.Hata chembe zilizo na malipo ya tuli sawa zitatenganisha protini za ukubwa tofauti kutoka kwa kila mmoja kutokana na athari za ungo huu wa molekuli.
Tofauti kati ya 10% na 12% ya gundi ya kutenganisha
Kulingana na uzito wa molekuli ya protini unayolenga, ikiwa ni protini yenye uzito mkubwa wa molekuli (zaidi ya 60KD), unaweza kutumia gundi 10%, ikiwa ni protini yenye uzito wa molekuli kati ya 60 na 30kd, unaweza kutumia 12 % gundi, na ikiwa ni chini ya 30kd, mimi kawaida kutumia gundi 15%.Jambo kuu ni kwamba wakati mstari wa kiashiria unatoka tu kwenye sehemu ya chini ya mpira, protini unayolenga inaweza kuwa katikati ya mpira.
Saizi ya pore ya gel inayolingana na viwango tofauti vya gel pia ni tofauti.Ukubwa wa pore na mkusanyiko mdogo ni kubwa, na ukubwa wa pore na mkusanyiko mkubwa ni mdogo.Kwa ujumla, gel ya kujitenga ni 12% na gel iliyojilimbikizia ni 5%, kwa sababu madhumuni ya gel iliyojilimbikizia ni kuzingatia protini zote kwenye mstari huo wa kuanzia, na kisha ingiza gel ya kujitenga kwa kujitenga.Kulingana na saizi ya protini.
Muda wa kutuma: Sep-05-2022
