செறிவூட்டப்பட்ட ஜெல் மற்றும் பிரிப்பு ஜெல் இடையே வேறுபாடு
செறிவூட்டப்பட்ட ஜெல்லின் pH மதிப்பு பிரிப்பு ஜெல்லில் இருந்து வேறுபட்டது.முந்தையது முக்கியமாக செறிவு விளைவைக் காட்டுகிறது, பிந்தையது சார்ஜ் விளைவு மற்றும் மூலக்கூறு சல்லடை விளைவைக் காட்டுகிறது.செறிவு விளைவு முக்கியமாக செறிவூட்டப்பட்ட ஜெல்லில் நிறைவு செய்யப்படுகிறது.செறிவூட்டப்பட்ட ஜெல்லின் pH 6.8 ஆகும்.இந்த pH நிபந்தனையின் கீழ், தாங்கலில் உள்ள HCl இன் கிட்டத்தட்ட அனைத்து Cl அயனிகளும் பிரிக்கப்படுகின்றன, மேலும் Gly இன் ஐசோ எலக்ட்ரிக் புள்ளி 6.0 ஆகும்.ஒரு சில மட்டுமே எதிர்மறை அயனிகளாக பிரிக்கப்படுகின்றன, அவை மின்சார புலத்தில் மிக மெதுவாக நகரும்.அமில புரதங்கள் இந்த pH இல் எதிர்மறை அயனிகளாகப் பிரிக்கப்படுகின்றன, மேலும் மூன்று வகையான அயனிகளின் இடம்பெயர்வு விகிதம் cl > General proteins > Gly ஆகும்.எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் தொடங்கிய பிறகு, Cl அயனிகள் வேகமாக நகர்ந்து, குறைந்த அயனி செறிவுப் பகுதியை விட்டுச் செல்கின்றன.மின்புலத்தில் கிளை மிக மெதுவாக நகர்கிறது, இதன் விளைவாக நகரும் அயனிகள் இல்லாததால், வேகமான மற்றும் மெதுவான அயனிகளுக்கு இடையே அயனிகள் இல்லாத உயர் மின்னழுத்த பகுதி உருவாகிறது.உயர் மின்னழுத்த பகுதியில் உள்ள அனைத்து எதிர்மறை அயனிகளும் அவற்றின் இயக்கத்தை துரிதப்படுத்தும்.அவை Cl அயன் பகுதிக்கு நகரும் போது, உயர் மின்னழுத்தம் மறைந்து, புரதத்தின் நகரும் வேகம் குறைகிறது.மேலே உள்ள நிலையான நிலை நிறுவப்பட்ட பிறகு, புரத மாதிரியானது வேகமான மற்றும் மெதுவான அயனிகளுக்கு இடையே ஒரு குறுகிய இடைவெளியை உருவாக்குவதற்கு செறிவூட்டப்படுகிறது, இது புரதத்தால் எடுத்துச் செல்லப்படும் எதிர்மறை மின்னூட்டத்தின் அளவிற்கு ஏற்ப பட்டைகளாக அமைக்கப்படுகிறது.செறிவூட்டப்பட்ட மாதிரி செறிவூட்டப்பட்ட ஜெல்லில் இருந்து பிரிப்பு ஜெல்லுக்குள் நுழைந்த பிறகு, ஜெல்லின் pH உயர்கிறது, கிளையின் விலகல் அளவு அதிகரிக்கிறது மற்றும் இயக்கம் உயர்கிறது.மேலும், அதன் மூலக்கூறு சிறியதாக இருப்பதால், இது அனைத்து புரத மூலக்கூறுகளையும் மீறுகிறது.Cl அயனிகள் இடம்பெயர்ந்த உடனேயே, குறைந்த அயனி செறிவு இருக்காது, இது ஒரு நிலையான மின்சார புல வலிமையை உருவாக்குகிறது.எனவே, பிரிப்பு ஜெல்லில் புரத மாதிரிகளைப் பிரிப்பது முக்கியமாக அதன் சார்ஜ் பண்புகள், மூலக்கூறு அளவு மற்றும் வடிவத்தைப் பொறுத்தது.பிரிப்பு ஜெல்லின் துளை அளவு ஒரு குறிப்பிட்ட அளவைக் கொண்டுள்ளது.வெவ்வேறு உறவினர் நிறை கொண்ட புரதங்களுக்கு, கடந்து செல்லும் போது பெறப்படும் ஹிஸ்டெரிசிஸ் விளைவு வேறுபட்டது.இந்த மூலக்கூறு சல்லடையின் விளைவால் சமமான நிலையான மின்னூட்டங்களைக் கொண்ட துகள்கள் கூட வெவ்வேறு அளவுகளில் உள்ள புரதங்களை ஒன்றிலிருந்து ஒன்று பிரிக்கும்.
பசை பிரிக்கும் 10% மற்றும் 12% இடையே வேறுபாடு
உங்கள் இலக்கு புரதத்தின் மூலக்கூறு எடையின்படி, அது பெரிய மூலக்கூறு எடை (60KD க்கு மேல்) கொண்ட புரதமாக இருந்தால், நீங்கள் 10% பசை பயன்படுத்தலாம், அது 60 முதல் 30kd வரை மூலக்கூறு எடை கொண்ட புரதமாக இருந்தால், நீங்கள் 12 ஐப் பயன்படுத்தலாம். % பசை, மற்றும் அது 30kd க்கும் குறைவாக இருந்தால், நான் வழக்கமாக 15% பசை பயன்படுத்துகிறேன்.முக்கிய விஷயம் என்னவென்றால், காட்டி வரியானது ரப்பரின் அடிப்பகுதியில் இருந்து வெளியேறும் போது, உங்கள் இலக்கு புரதம் ரப்பரின் நடுவில் இருக்கும்.
ஜெல்லின் வெவ்வேறு செறிவுகளுடன் தொடர்புடைய ஜெல்லின் துளை அளவும் வேறுபட்டது.சிறிய செறிவு கொண்ட துளை அளவு பெரியது, மற்றும் பெரிய செறிவு கொண்ட துளை அளவு சிறியது.பொதுவாக, பிரிப்பு ஜெல் 12% மற்றும் செறிவூட்டப்பட்ட ஜெல் 5% ஆகும், ஏனெனில் செறிவூட்டப்பட்ட ஜெல்லின் நோக்கம் அனைத்து புரதங்களையும் ஒரே தொடக்கக் கோட்டில் செறிவூட்டுவதாகும், பின்னர் பிரிப்புக்கான ஜெல்லை உள்ளிடவும்.புரதத்தின் அளவைப் பொறுத்தது.
இடுகை நேரம்: செப்-05-2022
