Konsentrlangan jel va ajratish jeli o'rtasidagi farq
Konsentrlangan jelning pH qiymati ajratuvchi jeldan farq qiladi.Birinchisi asosan konsentratsiya effektini ko'rsatadi, ikkinchisi esa zaryad effekti va molekulyar elak effektini ko'rsatadi.Konsentratsiyali ta'sir asosan konsentrlangan jelda yakunlanadi.Konsentrlangan jelning pH qiymati 6,8 ni tashkil qiladi.Bunday pH sharoitida buferdagi HCl ning deyarli barcha Cl ionlari dissotsilanadi va Gly ning izoelektrik nuqtasi 6,0 ga teng.Faqat bir nechtasi elektr maydonida juda sekin harakatlanadigan manfiy ionlarga ajraladi.Kislotali oqsillar bu pHda manfiy ionlarga ajraladi va uch turdagi ionlarning migratsiya tezligi cl > Umumiy oqsillar > Gly.Elektroforez boshlangandan so'ng, Cl ionlari past ion konsentratsiyasi maydonini qoldirib, tez harakatlanadi.Gly elektr maydonida juda sekin harakat qiladi, natijada harakatlanuvchi ionlar yo'q bo'lib ketadi, shuning uchun tez va sekin ionlar o'rtasida ionlari yo'q yuqori kuchlanishli hudud hosil bo'ladi.Yuqori kuchlanishli hududdagi barcha manfiy ionlar ularning harakatini tezlashtiradi.Ular Cl ion hududiga o'tganda, yuqori kuchlanish yo'qoladi va oqsilning harakat tezligi sekinlashadi.Yuqoridagi barqaror holat o'rnatilgandan so'ng, oqsil namunasi tez va sekin ionlar o'rtasida tor oraliq qatlam hosil qilish uchun konsentratsiyalanadi, u oqsil tomonidan olib boriladigan manfiy zaryad miqdori bo'yicha bantlarga joylashtiriladi.Konsentrlangan namuna konsentrlangan geldan ajratish jeliga kirgandan so'ng, gelning pH ko'tariladi, Gly ning dissotsilanish darajasi oshadi va harakatchanlik oshadi.Bundan tashqari, uning molekulasi kichik bo'lgani uchun u barcha oqsil molekulalaridan oshib ketadi.Cl ionlari ko'chib o'tgandan so'ng darhol past ion konsentratsiyasi mavjud bo'lmaydi va doimiy elektr maydon kuchini hosil qiladi.Shuning uchun ajratish jelida oqsil namunalarini ajratish asosan uning zaryad xususiyatlariga, molekulyar hajmiga va shakliga bog'liq.Ajratish jelining gözenek hajmi ma'lum bir o'lchamga ega.Har xil nisbiy massaga ega bo'lgan oqsillar uchun o'tish paytida olingan histerezis effekti boshqacha.Hatto teng statik zaryadga ega bo'lgan zarralar ham ushbu molekulyar elakning ta'siri tufayli turli o'lchamdagi oqsillarni bir-biridan ajratib turadi.
Ajratuvchi elimning 10% dan 12% gacha bo'lgan farqi
Maqsadli oqsilingizning molekulyar og'irligiga ko'ra, agar u kattaroq molekulyar og'irlikdagi (60KD dan yuqori) protein bo'lsa, siz 10% elimdan foydalanishingiz mumkin, agar u 60 dan 30 kd gacha bo'lgan molekulyar og'irlikdagi oqsil bo'lsa, siz 12 dan foydalanishingiz mumkin. % elim va agar u 30kd dan past bo'lsa, men odatda 15% elim ishlataman.Asosiy nuqta shundaki, indikator chizig'i kauchuk pastki qismidan tugasa, maqsadli oqsilingiz kauchukning o'rtasida bo'lishi mumkin.
Jelning turli konsentrasiyalariga mos keladigan gelning gözenek hajmi ham har xil.Kichik konsentratsiyali gözenek hajmi katta va katta konsentratsiyali gözenek hajmi kichik.Odatda, ajratish jeli 12% va konsentrlangan jel 5% ni tashkil qiladi, chunki konsentrlangan jelning maqsadi barcha oqsillarni bir xil boshlang'ich chiziqqa to'plash va keyin ajratish uchun ajratish jelini kiritishdir.Proteinning hajmiga qarab.
Yuborilgan vaqt: 2022 yil 05-sentabr
