ঘনীভূত জেল এবং বিচ্ছেদ জেলের মধ্যে পার্থক্য

বিচ্ছিন্ন, এবং Gly এর আইসোইলেক্ট্রিক পয়েন্ট হল 6.0।কেবলমাত্র কয়েকটি ঋণাত্মক আয়নে বিচ্ছিন্ন হয়, যা বৈদ্যুতিক ক্ষেত্রে খুব ধীরে ধীরে চলে।অম্লীয় প্রোটিনগুলি এই পিএইচ-এ ঋণাত্মক আয়নে বিচ্ছিন্ন হয় এবং তিন ধরনের আয়নগুলির স্থানান্তর হার হল cl > সাধারণ প্রোটিন > গ্লাই।ইলেক্ট্রোফোরেসিস শুরু হওয়ার পরে, Cl আয়নগুলি দ্রুত সরে যায়, একটি কম আয়ন ঘনত্বের ক্ষেত্রকে পিছনে ফেলে।গ্লাই বৈদ্যুতিক ক্ষেত্রে খুব ধীর গতিতে চলে, যার ফলে চলমান আয়নের অভাব হয়, তাই দ্রুত এবং ধীর আয়নের মধ্যে আয়নহীন একটি উচ্চ-ভোল্টেজ অঞ্চল তৈরি হয়।উচ্চ-ভোল্টেজ অঞ্চলের সমস্ত ঋণাত্মক আয়ন তাদের চলাচলকে ত্বরান্বিত করবে।যখন তারা Cl আয়ন অঞ্চলে চলে যায়, তখন উচ্চ ভোল্টেজ অদৃশ্য হয়ে যায় এবং প্রোটিনের চলমান গতি কমে যায়।উপরোক্ত স্থিতিশীল অবস্থা প্রতিষ্ঠিত হওয়ার পরে, প্রোটিন নমুনাটি দ্রুত এবং ধীর আয়নগুলির মধ্যে ঘনীভূত হয়ে একটি সংকীর্ণ আন্তস্তর তৈরি করে, এটি প্রোটিনের দ্বারা বাহিত ঋণাত্মক চার্জের পরিমাণ অনুসারে ব্যান্ডে সাজানো হয়।ঘনীভূত নমুনা ঘনীভূত জেল থেকে পৃথকীকরণ জেলে প্রবেশ করার পরে, জেলের পিএইচ বেড়ে যায়, গ্লাইয়ের বিচ্ছিন্নতা ডিগ্রী বৃদ্ধি পায় এবং গতিশীলতা বৃদ্ধি পায়।তাছাড়া, এর অণু ছোট হওয়ায় এটি সমস্ত প্রোটিন অণুকে ছাড়িয়ে যায়।Cl আয়ন স্থানান্তরিত হওয়ার পরপরই, নিম্ন আয়ন ঘনত্ব আর বিদ্যমান থাকে না, একটি ধ্রুবক বৈদ্যুতিক ক্ষেত্রের শক্তি গঠন করে।অতএব, বিচ্ছেদ জেলে প্রোটিন নমুনাগুলির বিচ্ছেদ প্রধানত এর চার্জ বৈশিষ্ট্য, আণবিক আকার এবং আকৃতির উপর নির্ভর করে।বিচ্ছেদ জেলের ছিদ্র আকার একটি নির্দিষ্ট আকার আছে।বিভিন্ন আপেক্ষিক ভর সহ প্রোটিনের জন্য, পাস করার সময় প্রাপ্ত হিস্টেরেসিস প্রভাব ভিন্ন।এমনকি সমান স্ট্যাটিক চার্জযুক্ত কণাও এই আণবিক চালনির প্রভাবের কারণে একে অপরের থেকে বিভিন্ন আকারের প্রোটিনকে আলাদা করবে।

10% এবং 12% পৃথক আঠালো মধ্যে পার্থক্য

আপনার লক্ষ্য প্রোটিনের আণবিক ওজন অনুসারে, যদি এটি একটি বড় আণবিক ওজন (60KD এর উপরে) একটি প্রোটিন হয়, আপনি 10% আঠা ব্যবহার করতে পারেন, যদি এটি 60 এবং 30kd এর মধ্যে আণবিক ওজন সহ একটি প্রোটিন হয়, আপনি 12 ব্যবহার করতে পারেন % আঠালো, এবং যদি এটি 30kd এর কম হয়, আমি সাধারণত 15% আঠালো ব্যবহার করি।মূল বিষয় হল যে যখন নির্দেশক রেখাটি রাবারের নীচে চলে যায়, তখন আপনার লক্ষ্য প্রোটিন রাবারের ঠিক মাঝখানে থাকতে পারে।

জেলের বিভিন্ন ঘনত্বের সাথে মিলিত জেলের ছিদ্রের আকারও আলাদা।ছোট ঘনত্ব সহ ছিদ্রের আকার বড় এবং বড় ঘনত্ব সহ ছিদ্রের আকার ছোট।সাধারণত, বিচ্ছেদ জেল হয় 12% এবং ঘনীভূত জেল 5%, কারণ ঘনীভূত জেলের উদ্দেশ্য হল সমস্ত প্রোটিনকে একই প্রারম্ভিক লাইনে কেন্দ্রীভূত করা এবং তারপর বিচ্ছেদের জন্য বিচ্ছেদ জেলে প্রবেশ করা।প্রোটিনের আকারের উপর নির্ভর করে।