Bentenipun antarane gel klempakan langel pamisah
Nilai pH saka gel pekat beda karo gel pemisah.Tilas utamane nuduhake efek konsentrasi, dene sing terakhir nuduhake efek muatan lan efek sieve molekuler.Efek konsentrasi utamane rampung ing gel pekat.pH saka gel pekat yaiku 6,8.Ing kondisi pH iki, meh kabeh ion Cl saka HCl ing buffer
disosiasi, lan titik isoelektrik Gly yaiku 6.0.Mung sawetara sing dissosiasi dadi ion negatif, sing obah alon banget ing medan listrik.Protein asam dipisahake dadi ion negatif ing pH iki, lan tingkat migrasi saka telung jinis ion kasebut yaiku cl> Protein Umum> Gly.Sawise elektroforesis diwiwiti, ion Cl obah kanthi cepet, ninggalake area konsentrasi ion sing sithik.Gly obah alon banget ing medan listrik, nyebabake kekurangan ion sing obah, saengga wilayah voltase dhuwur sing kurang ion dibentuk antarane ion cepet lan alon.Kabeh ion negatif ing wilayah voltase dhuwur bakal nyepetake gerakane.Nalika padha pindhah menyang wilayah ion Cl, voltase dhuwur ilang, lan kacepetan obah saka protein slows mudhun.Sawise negara stabil ndhuwur ditetepake, sampel protein wis klempakan antarane ion cepet lan alon kanggo mbentuk interlayer panah, Iki disusun menyang bands miturut jumlah muatan negatif digawa dening protein.Sawise sampel klempakan lumebu ing gel misahake saka gel klempakan, pH saka gel mundhak, tingkat disosiasi Gly mundhak, lan mobilitas mundhak.Kajaba iku, amarga molekule cilik, ngluwihi kabeh molekul protein.Sanalika sawise ion Cl migrasi, konsentrasi ion sing sithik ora ana maneh, mbentuk kekuatan medan listrik sing konstan.Mulane, Pemisahan conto protein ing gel pamisah utamane gumantung marang sifat muatan, ukuran lan wujud molekul.Ukuran pori saka gel pamisah nduweni ukuran tartamtu.Kanggo protein karo massa relatif beda, efek hysteresis ditampa nalika liwat beda.Malah partikel kanthi muatan statis sing padha bakal misahake protèin kanthi ukuran sing béda-béda amarga efek saka sieve molekuler iki.
Bedane antarane 10% lan 12% saka lem pamisah
Miturut bobot molekul protein target sampeyan, yen protein sing bobot molekul luwih gedhe (luwih saka 60KD), sampeyan bisa nggunakake lem 10%, yen protein sing bobot molekul antarane 60 lan 30kd, sampeyan bisa nggunakake 12 % lim, lan yen luwih murah tinimbang 30kd, Aku biasane nggunakake 15% lim.Titik utama yaiku nalika garis indikator mung metu saka ngisor karet, protein target sampeyan bisa uga ana ing tengah karet.
Ukuran pori gel sing cocog karo konsentrasi gel sing beda uga beda.Ukuran pori kanthi konsentrasi cilik gedhe, lan ukuran pori kanthi konsentrasi gedhe cilik.Umumé, gel pamisah 12% lan gel klempakan 5%, amarga tujuan saka gel klempakan kanggo musataken kabeh protein ing baris wiwitan padha, lan banjur ketik gel pamisahan kanggo misahake.Gumantung ing ukuran protein.
Wektu kirim: Sep-05-2022
