Sự khác biệt giữa gel cô đặc và gel tách

phân ly và điểm đẳng điện của Gly là 6,0.Chỉ một số ít bị phân ly thành ion âm, chúng chuyển động rất chậm trong điện trường.Các protein có tính axit được phân tách thành các ion âm ở độ pH này và tốc độ di chuyển của ba loại ion là cl > Protein chung > Gly.Sau khi quá trình điện di bắt đầu, các ion Cl di chuyển nhanh, để lại một vùng có nồng độ ion thấp phía sau.Gly chuyển động rất chậm trong điện trường nên thiếu các ion chuyển động nên giữa các ion nhanh và chậm hình thành vùng điện thế cao thiếu ion.Tất cả các ion âm trong vùng điện áp cao sẽ tăng tốc chuyển động của chúng.Khi chúng di chuyển đến vùng ion Cl, điện áp cao sẽ biến mất và tốc độ di chuyển của protein chậm lại.Sau khi trạng thái ổn định ở trên được thiết lập, mẫu protein được tập trung giữa các ion nhanh và chậm để tạo thành một lớp xen kẽ hẹp, Nó được sắp xếp thành các dải tùy theo lượng điện tích âm mà protein mang theo.Sau khi mẫu cô đặc đi vào gel tách khỏi gel cô đặc, độ pH của gel tăng lên, mức độ phân ly của Gly tăng lên và độ linh động tăng lên.Hơn nữa, vì phân tử của nó nhỏ nên nó vượt quá tất cả các phân tử protein.Ngay sau khi ion Cl di chuyển, nồng độ ion thấp không còn nữa, tạo thành cường độ điện trường không đổi.Do đó, việc tách các mẫu protein trong gel tách chủ yếu phụ thuộc vào tính chất điện tích, kích thước và hình dạng phân tử của nó.Kích thước lỗ của gel tách có kích thước nhất định.Đối với các protein có khối lượng tương đối khác nhau, hiệu ứng trễ nhận được khi đi qua là khác nhau.Ngay cả các hạt có điện tích tĩnh bằng nhau sẽ tách các protein có kích thước khác nhau ra khỏi nhau do tác dụng của sàng phân tử này.

Sự khác biệt giữa 10% và 12% keo tách

Theo trọng lượng phân tử của protein mục tiêu của bạn, nếu đó là protein có trọng lượng phân tử lớn hơn (trên 60KD), bạn có thể sử dụng 10% keo, nếu đó là protein có trọng lượng phân tử từ 60 đến 30kd, bạn có thể sử dụng 12 % keo, còn dưới 30kd thì mình thường dùng keo 15%.Điểm chính là khi đường chỉ báo vừa chạy ra khỏi đáy cao su, protein mục tiêu của bạn có thể ở ngay giữa cao su.

Kích thước lỗ xốp của gel tương ứng với các nồng độ khác nhau của gel cũng khác nhau.Kích thước lỗ chân lông với nồng độ nhỏ là lớn và kích thước lỗ chân lông với nồng độ lớn là nhỏ.Nói chung, gel tách là 12% và gel cô đặc là 5%, vì mục đích của gel cô đặc là cô đặc tất cả các protein trên cùng một vạch xuất phát, sau đó nhập gel tách để tách.Tùy thuộc vào kích thước của protein.