浓缩胶和分离胶的区别

解离，Gly的等电点为6.0。只有少数解离成负离子，负离子在电场中移动非常缓慢。酸性蛋白质在此pH值下解离成负离子，三类离子的迁移速率为cl>一般蛋白质>Gly。电泳开始后，Cl离子快速移动，留下低离子浓度区域。Gly在电场中移动非常缓慢，导致缺少移动离子，因此在快离子和慢离子之间形成缺少离子的高压区。所有处于高压区的负离子都会加速它们的运动。当它们移动到Cl离子区时，高压消失，蛋白质的移动速度减慢。上述稳定状态建立后，蛋白质样品集中在快离子和慢离子之间，形成狭窄的夹层，根据蛋白质所带负电荷的多少排列成条带。浓缩后的样品从浓缩胶进入分离胶后，凝胶的pH升高，Gly的解离度增加，迁移率升高。而且，由于它的分子很小，超过了所有的蛋白质分子。Cl离子迁移后，低离子浓度立即不复存在，形成恒定的电场强度。因此，分离胶对蛋白质样品的分离主要取决于其电荷性质、分子大小和形状。分离胶的孔径有一定的大小。对于不同相对质量的蛋白质，通过时受到的滞后效应是不同的。由于这种分子筛的作用，即使具有相同静电荷的粒子也会将不同大小的蛋白质彼此分开。

10%和12%分离胶的区别

根据你的目的蛋白的分子量，如果是分子量较大的蛋白（60KD以上），可以用10%的胶水，如果是分子量在60-30kD之间的蛋白，可以用12 %胶水，如果低于30kd，我一般用15%的胶水。要点是，当指示线刚好超出橡胶底部时，您的目标蛋白可能就在橡胶的中间。

不同浓度的凝胶对应的凝胶孔径大小也不同。浓度小的孔径大，浓度大的孔径小。一般分离胶为12%，浓缩胶为5%，因为浓缩胶的目的是将所有蛋白浓缩在同一个起跑线上，然后进入分离胶进行分离。取决于蛋白质的大小。