Концентрлі гель мен бөлу гелінің айырмашылығы

диссоциацияланған, ал Глидің изоэлектрлік нүктесі 6,0.Тек кейбіреулері электр өрісінде өте баяу қозғалатын теріс иондарға диссоциацияланады.Қышқылдық ақуыздар осы рН кезінде теріс иондарға диссоциацияланады және иондардың үш түрінің көшу жылдамдығы cl > Жалпы ақуыздар > Gly.Электрофорез басталғаннан кейін Cl иондары иондар концентрациясы төмен аймақты қалдырып, жылдам қозғалады.Гли электр өрісінде өте баяу қозғалады, нәтижесінде қозғалатын иондар жетіспейді, сондықтан жылдам және баяу иондар арасында иондары жоқ жоғары вольтты аймақ пайда болады.Жоғары вольтты аймақтағы барлық теріс иондар олардың қозғалысын тездетеді.Олар Cl ионының аймағына ауысқанда жоғары кернеу жоғалады, ал ақуыздың қозғалу жылдамдығы баяулайды.Жоғарыда көрсетілген тұрақты күй орнатылғаннан кейін ақуыз үлгісі тар аралық қабат құру үшін жылдам және баяу иондар арасында шоғырланады, ол ақуыз тасымалдайтын теріс зарядтың мөлшеріне сәйкес жолақтарға орналасады.Концентрленген үлгі концентрлі гельден бөлу геліне түскеннен кейін гельдің рН жоғарылайды, Gly диссоциация дәрежесі жоғарылайды және қозғалғыштығы жоғарылайды.Оның үстіне, оның молекуласы кішкентай болғандықтан, ол барлық ақуыз молекулаларынан асып түседі.Cl иондары көшкеннен кейін бірден төмен ион концентрациясы болмайды, тұрақты электр өрісінің кернеулігін құрайды.Сондықтан бөлгіш гельдегі ақуыз үлгілерінің бөлінуі негізінен оның зарядтық қасиеттеріне, молекулалық өлшеміне және пішініне байланысты.Бөлгіш гельдің кеуек өлшемі белгілі бір өлшемге ие.Салыстырмалы массасы әртүрлі белоктар үшін өту кезінде алынған гистерезис әсері әртүрлі.Тіпті статикалық зарядтары бірдей бөлшектер де осы молекулалық електің әсерінен әртүрлі мөлшердегі ақуыздарды бір-бірінен ажыратады.

Бөлгіш желімнің 10% және 12% арасындағы айырмашылық

Мақсатты протеиннің молекулалық салмағына сәйкес, егер ол үлкенірек молекулалық массасы бар ақуыз болса (60KD-дан жоғары), сіз 10% желім пайдалана аласыз, егер ол 60 және 30кд молекулалық салмағы бар ақуыз болса, 12 пайдалана аласыз. % желім, ал егер ол 30кд төмен болса, мен әдетте 15% желім қолданамын.Ең бастысы, индикатор сызығы резеңке түбінен таусылғанда, сіздің мақсатты ақуызыңыз резеңкенің дәл ортасында болуы мүмкін.

Гельдің әртүрлі концентрацияларына сәйкес келетін гельдің кеуектері де әртүрлі.Аз концентрациялы кеуек өлшемі үлкен, ал үлкен концентрациясы бар кеуек өлшемі аз.Жалпы алғанда, бөлу гелі 12% және концентрлі гель 5% құрайды, өйткені концентрлі гельдің мақсаты барлық ақуыздарды бір бастапқы сызыққа шоғырландыру, содан кейін бөлуге арналған гельді енгізу.Белоктың мөлшеріне байланысты.