કેન્દ્રિત જેલ અને અલગતા જેલ વચ્ચેનો તફાવત

ડિસોસિયેટેડ, અને Gly નો આઇસોઇલેક્ટ્રિક પોઇન્ટ 6.0 છે.માત્ર થોડા જ નકારાત્મક આયનોમાં વિભાજિત થાય છે, જે ઇલેક્ટ્રિક ક્ષેત્રમાં ખૂબ જ ધીમેથી આગળ વધે છે.એસિડિક પ્રોટીન આ pH પર નકારાત્મક આયનોમાં વિભાજિત થાય છે, અને ત્રણ પ્રકારના આયનોનો સ્થળાંતર દર cl > સામાન્ય પ્રોટીન > Gly છે.ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ શરૂ થયા પછી, Cl આયનો ઝડપથી આગળ વધે છે, નીચા આયન સાંદ્રતા વિસ્તારને પાછળ છોડી દે છે.ઇલેક્ટ્રિક ફિલ્ડમાં ગ્લાય ખૂબ જ ધીમી ગતિએ ફરે છે, પરિણામે ગતિશીલ આયનોનો અભાવ હોય છે, તેથી ઝડપી અને ધીમા આયન વચ્ચે આયનોનો અભાવ ધરાવતા ઉચ્ચ-વોલ્ટેજ પ્રદેશની રચના થાય છે.ઉચ્ચ-વોલ્ટેજ પ્રદેશમાં તમામ નકારાત્મક આયનો તેમની હિલચાલને વેગ આપશે.જ્યારે તેઓ Cl આયન પ્રદેશમાં જાય છે, ત્યારે ઉચ્ચ વોલ્ટેજ અદૃશ્ય થઈ જાય છે, અને પ્રોટીનની ગતિ ધીમી પડી જાય છે.ઉપરોક્ત સ્થિર સ્થિતિ સ્થાપિત થયા પછી, પ્રોટીન નમૂનાને સાંકડી આંતરસ્તર બનાવવા માટે ઝડપી અને ધીમા આયનો વચ્ચે કેન્દ્રિત કરવામાં આવે છે, તે પ્રોટીન દ્વારા વહન કરવામાં આવતા નકારાત્મક ચાર્જની માત્રા અનુસાર બેન્ડમાં ગોઠવાય છે.સંકેન્દ્રિત નમૂનો સાંદ્ર જેલમાંથી વિભાજન જેલમાં પ્રવેશે છે તે પછી, જેલનું pH વધે છે, Gly ની વિયોજન ડિગ્રી વધે છે, અને ગતિશીલતા વધે છે.તદુપરાંત, કારણ કે તેના પરમાણુ નાના છે, તે બધા પ્રોટીન પરમાણુઓ કરતાં વધી જાય છે.Cl આયનોના સ્થળાંતર પછી તરત જ, નીચી આયન સાંદ્રતા હવે અસ્તિત્વમાં નથી, જે સતત ઇલેક્ટ્રિક ક્ષેત્રની મજબૂતાઈ બનાવે છે.તેથી, વિભાજન જેલમાં પ્રોટીન નમૂનાઓનું વિભાજન મુખ્યત્વે તેના ચાર્જ ગુણધર્મો, પરમાણુ કદ અને આકાર પર આધારિત છે.વિભાજન જેલના છિદ્રનું કદ ચોક્કસ કદ ધરાવે છે.વિવિધ સાપેક્ષ સમૂહ સાથેના પ્રોટીન માટે, જ્યારે પસાર થાય છે ત્યારે પ્રાપ્ત થતી હિસ્ટેરેસિસ અસર અલગ હોય છે.સમાન સ્થિર ચાર્જવાળા કણો પણ આ પરમાણુ ચાળણીની અસરને કારણે વિવિધ કદના પ્રોટીનને એકબીજાથી અલગ કરશે.

અલગ કરતા ગુંદરના 10% અને 12% વચ્ચેનો તફાવત

તમારા લક્ષ્ય પ્રોટીનના પરમાણુ વજન અનુસાર, જો તે મોટા પરમાણુ વજન (60KD થી વધુ) ધરાવતું પ્રોટીન હોય, તો તમે 10% ગુંદરનો ઉપયોગ કરી શકો છો, જો તે 60 અને 30kd ની વચ્ચેના પરમાણુ વજન સાથેનું પ્રોટીન હોય, તો તમે 12% ગુંદરનો ઉપયોગ કરી શકો છો. % ગુંદર, અને જો તે 30kd કરતા ઓછું હોય, તો હું સામાન્ય રીતે 15% ગુંદરનો ઉપયોગ કરું છું.મુખ્ય મુદ્દો એ છે કે જ્યારે સૂચક રેખા રબરના તળિયેથી બહાર નીકળી જાય છે, ત્યારે તમારું લક્ષ્ય પ્રોટીન રબરની મધ્યમાં હોઈ શકે છે.

જેલની વિવિધ સાંદ્રતાને અનુરૂપ જેલનું છિદ્રનું કદ પણ અલગ છે.નાની સાંદ્રતા સાથે છિદ્રનું કદ મોટું છે, અને મોટી સાંદ્રતા સાથે છિદ્રનું કદ નાનું છે.સામાન્ય રીતે, વિભાજન જેલ 12% હોય છે અને કેન્દ્રિત જેલ 5% હોય છે, કારણ કે કેન્દ્રિત જેલનો હેતુ તમામ પ્રોટીનને સમાન પ્રારંભિક રેખા પર કેન્દ્રિત કરવાનો છે, અને પછી વિભાજન માટે વિભાજન જેલ દાખલ કરો.પ્રોટીનના કદ પર આધાર રાખે છે.