Forskellen mellem koncentreret gel og separationsgel

dissocieret, og det isoelektriske punkt for Gly er 6,0.Kun få er dissocieret til negative ioner, som bevæger sig meget langsomt i det elektriske felt.Sure proteiner dissocieres til negative ioner ved denne pH, og migrationshastigheden for de tre typer ioner er cl > Generelle proteiner > Gly.Efter elektroforesen starter, bevæger Cl-ioner sig hurtigt og efterlader et område med lav ionkoncentration.Gly bevæger sig meget langsomt i det elektriske felt, hvilket resulterer i manglen på bevægelige ioner, så der dannes et højspændingsområde uden ioner mellem hurtige og langsomme ioner.Alle negative ioner i højspændingsområdet vil fremskynde deres bevægelse.Når de bevæger sig til Cl-ion-området, forsvinder højspændingen, og proteinets bevægelseshastighed aftager.Efter at ovennævnte stabile tilstand er etableret, koncentreres proteinprøven mellem hurtige og langsomme ioner for at danne et smalt mellemlag. Det er arrangeret i bånd i henhold til mængden af ​​negativ ladning, som proteinet bærer.Efter at den koncentrerede prøve kommer ind i separationsgelen fra den koncentrerede gel, stiger gelens pH, dissociationsgraden af ​​Gly stiger, og mobiliteten stiger.Fordi dets molekyle er lille, overstiger det desuden alle proteinmolekyler.Umiddelbart efter Cl-ioners migrering eksisterer den lave ionkoncentration ikke længere, hvilket danner en konstant elektrisk feltstyrke.Derfor afhænger adskillelsen af ​​proteinprøver i separationsgelen hovedsagelig af dens ladningsegenskaber, molekylstørrelse og form.Separationsgelens porestørrelse har en vis størrelse.For proteiner med forskellig relativ masse er hystereseeffekten, der modtages, når den passerer, forskellig.Selv partikler med lige statiske ladninger vil adskille proteiner af forskellig størrelse fra hinanden på grund af effekten af ​​denne molekylsigte.

Forskellen mellem 10% og 12% af skillelim

Ifølge molekylvægten af ​​dit målprotein, hvis det er et protein med en større molekylvægt (over 60KD), kan du bruge 10% lim, hvis det er et protein med en molekylvægt mellem 60 og 30kd, kan du bruge 12 % lim, og hvis det er lavere end 30kd, bruger jeg normalt 15 % lim.Hovedpointen er, at når indikatorlinjen lige løber ud af gummibunden, kan dit målprotein være lige i midten af ​​gummiet.

Porestørrelsen af ​​gel svarende til forskellige koncentrationer af gel er også forskellig.Porestørrelsen med lille koncentration er stor, og porestørrelsen med stor koncentration er lille.Generelt er separationsgelen 12%, og den koncentrerede gel er 5%, fordi formålet med den koncentrerede gel er at koncentrere alle proteiner på den samme startlinje og derefter gå ind i separationsgelen til separation.Afhængig af proteinets størrelse.