Розніца паміж канцэнтраваным гелем і раздзяляльным гелем

дысацыявалі, а ізаэлектрычная кропка Gly роўная 6,0.Толькі нешматлікія дысацыююць на адмоўныя іёны, якія вельмі павольна рухаюцца ў электрычным полі.Кіслыя вавёркі дысацыююць на адмоўныя іёны пры гэтым рн, і хуткасць міграцыі трох тыпаў іёнаў складае cl> Агульныя вавёркі> Gly.Пасля пачатку электрафарэзу іёны Cl рухаюцца хутка, пакідаючы за сабой вобласць з нізкай канцэнтрацыяй іёнаў.Gly вельмі павольна рухаецца ў электрычным полі, што прыводзіць да адсутнасці рухомых іёнаў, таму паміж хуткімі і павольнымі іёнамі ўтвараецца вобласць высокага напружання без іёнаў.Усе адмоўныя іёны ў вобласці высокага напружання паскараюць свой рух.Калі яны перамяшчаюцца ў вобласць іёнаў Cl, высокае напружанне знікае, і хуткасць руху бялку запавольваецца.Пасля ўсталявання вышэйзгаданага стабільнага стану ўзор бялку канцэнтруецца паміж хуткімі і павольнымі іёнамі з адукацыяй вузкай праслойкі, якая размяшчаецца ў палосы ў залежнасці ад колькасці адмоўнага зарада, які нясе бялок.Пасля таго, як канцэнтраваны ўзор трапляе ў гель для аддзялення ад канцэнтраванага геля, рн геля павышаецца, ступень дысацыяцыі Gly павялічваецца і рухомасць павышаецца.Больш за тое, паколькі яго малекула малая, яна перавышае ўсе малекулы бялку.Адразу пасля міграцыі іёнаў Cl нізкая канцэнтрацыя іёнаў больш не існуе, утвараючы пастаяннае напружанасць электрычнага поля.Такім чынам, падзел узораў бялку ў сепарацыйным гелі ў асноўным залежыць ад уласцівасцей яго зарада, малекулярнага памеру і формы.Памер пор раздзяляльнага геля мае пэўны памер.Для бялкоў з рознай адноснай масай эфект гістарэзісу, атрыманы пры праходжанні, адрозніваецца.Нават часціцы з аднолькавымі статычнымі зарадамі будуць аддзяляць бялкі рознага памеру адзін ад аднаго з-за эфекту гэтага малекулярнага сіта.

Розніца паміж 10% і 12% раздзяляльнага клею

У залежнасці ад малекулярнай масы мэтавага бялку, калі гэта бялок з большай малекулярнай масай (вышэй за 60 кД), вы можаце выкарыстоўваць 10% клею, калі гэта бялок з малекулярнай масай ад 60 да 30 кД, вы можаце выкарыстоўваць 12 % клею, і калі ён ніжэйшы за 30kd, я звычайна выкарыстоўваю 15% клею.Галоўнае заключаецца ў тым, што калі лінія індыкатара проста заканчваецца з гумовага дна, ваш мэтавы бялок можа знаходзіцца проста ў сярэдзіне гумы.

Памер пор геля, які адпавядае розным канцэнтрацыям геля, таксама розны.Памер пор з малой канцэнтрацыяй вялікі, а памер пор з вялікай канцэнтрацыяй малы.Як правіла, раздзяляльны гель складае 12%, а канцэнтраваны гель - 5%, таму што мэта канцэнтраванага геля - канцэнтраваць усе вавёркі на адной зыходнай лініі, а затым уводзіць у раздзяляльны гель для падзелу.У залежнасці ад памеру бялку.