농축 젤과 분리 젤의 차이점

해리되고 Gly의 등전점은 6.0입니다.극소수만이 음이온으로 분해되어 전기장에서 매우 느리게 움직입니다.산성 단백질은 이 pH에서 음이온으로 해리되며 세 가지 이온의 이동 속도는 cl > 일반 단백질 > Gly 순이다.전기 영동이 시작된 후 Cl 이온은 빠르게 이동하여 이온 농도가 낮은 영역을 남깁니다.Gly는 전기장에서 매우 느리게 움직이기 때문에 이동하는 이온이 부족하여 빠른 이온과 느린 이온 사이에 이온이 부족한 고전압 영역이 형성됩니다.고전압 영역의 모든 음이온은 이동을 가속화합니다.Cl 이온 영역으로 이동하면 고전압이 사라지고 단백질의 이동 속도가 느려집니다.위의 안정 상태가 성립된 후, 단백질 샘플은 빠른 이온과 느린 이온 사이에 집중되어 좁은 중간층을 형성하고, 단백질이 운반하는 음전하의 양에 따라 밴드로 배열됩니다.농축된 시료가 농축된 겔에서 분리 겔로 들어간 후 겔의 pH가 상승하고 Gly의 해리도가 증가하며 이동도가 상승한다.또한 분자가 작기 때문에 모든 단백질 분자를 능가합니다.Cl 이온이 이동한 직후 낮은 이온 농도는 더 이상 존재하지 않아 일정한 전계 강도를 형성합니다.따라서 분리 젤에서 단백질 시료의 분리는 주로 전하 특성, 분자 크기 및 모양에 따라 달라집니다.분리 젤의 기공 크기는 일정한 크기를 가지고 있습니다.상대 질량이 다른 단백질의 경우 통과할 때 받는 히스테리시스 효과가 다릅니다.정전하가 같은 입자라도 이 분자체의 효과로 인해 크기가 다른 단백질을 서로 분리합니다.

분리 접착제의 10%와 12%의 차이

목표 단백질의 분자량에 따라 분자량이 큰 단백질(60KD 이상)인 경우 10% 접착제를 사용할 수 있고, 분자량이 60~30kd인 단백질인 경우 12% 접착제를 사용할 수 있습니다. % 접착제, 그리고 30kd 미만이면 보통 15% 접착제를 사용합니다.요점은 표시선이 고무 바닥을 막 벗어나면 목표 단백질이 고무의 중간에 있을 수 있다는 것입니다.

다른 농도의 젤에 해당하는 젤의 기공 크기도 다릅니다.농도가 작으면 기공크기가 크고 농도가 크면 기공크기가 작다.일반적으로 분리 젤은 12%이고 농축 젤은 5%인데, 농축 젤의 목적은 모든 단백질을 동일한 출발선에 집중시킨 다음 분리 젤에 들어가 분리하는 것이기 때문입니다.단백질의 크기에 따라 다릅니다.