Differenza bejn ġel konċentrat uġel tas-separazzjoni
Il-valur tal-pH tal-ġell ikkonċentrat huwa differenti minn dak tal-ġel tas-separazzjoni.L-ewwel juri prinċipalment effett ta 'konċentrazzjoni, filwaqt li l-aħħar juri effett ta' ħlas u effett ta 'għarbiel molekulari.L-effett tal-konċentrazzjoni jitlesta prinċipalment fil-ġell ikkonċentrat.Il-pH tal-ġell ikkonċentrat huwa 6.8.Taħt din il-kundizzjoni tal-pH, kważi l-joni Cl kollha ta 'HCl fil-buffer huma
dissoċjat, u l-punt iżoelettriku ta 'Gly huwa 6.0.Ftit biss huma dissoċjati fi joni negattivi, li jimxu bil-mod ħafna fil-kamp elettriku.Proteini aċidużi huma dissoċjati f'joni negattivi f'dan il-pH, u r-rata ta 'migrazzjoni tat-tliet tipi ta' joni hija cl > Proteini ġenerali > Gly.Wara li tibda l-elettroforesi, il-joni Cl jimxu malajr, u jħallu żona ta 'konċentrazzjoni baxxa ta' joni wara.Gly jiċċaqlaq bil-mod ħafna fil-kamp elettriku, li jirriżulta fin-nuqqas ta 'jonji li jiċċaqilqu, għalhekk reġjun ta' vultaġġ għoli nieqes minn joni huwa ffurmat bejn joni veloċi u bil-mod.Il-joni negattivi kollha fir-reġjun ta 'vultaġġ għoli se jaċċelleraw il-moviment tagħhom.Meta jimxu lejn ir-reġjun tal-jone Cl, il-vultaġġ għoli jisparixxi, u l-veloċità li tiċċaqlaq tal-proteina tonqos.Wara li jiġi stabbilit l-istat stabbli ta 'hawn fuq, il-kampjun tal-proteina huwa kkonċentrat bejn jonji veloċi u bil-mod biex jifforma saff ta' bejn is-saffi dejjaq, Huwa rranġat f'meded skond l-ammont ta 'ċarġ negattiv li jinġarr mill-proteina.Wara li l-kampjun ikkonċentrat jidħol fil-ġel tas-separazzjoni mill-ġell ikkonċentrat, il-pH tal-ġell jogħla, il-grad ta 'dissoċjazzjoni ta' Gly jiżdied, u l-mobilità togħla.Barra minn hekk, minħabba li l-molekula tagħha hija żgħira, taqbeż il-molekuli tal-proteini kollha.Immedjatament wara li l-joni Cl jemigraw, il-konċentrazzjoni baxxa tal-jone m'għadhiex teżisti, u tifforma qawwa kostanti tal-kamp elettriku.Għalhekk, Is-separazzjoni tal-kampjuni tal-proteini fil-ġel tas-separazzjoni tiddependi prinċipalment fuq il-proprjetajiet ta 'ċarġ tagħha, id-daqs molekulari u l-għamla.Id-daqs tal-pori tal-ġel tas-separazzjoni għandu ċertu daqs.Għal proteini b'massa relattiva differenti, l-effett ta 'isteresi riċevut meta jgħaddi huwa differenti.Anke partiċelli bi ħlasijiet statiċi ugwali se jisseparaw proteini ta 'daqsijiet differenti minn xulxin minħabba l-effett ta' dan l-għarbiel molekulari.
Differenza bejn 10% u 12% tal-kolla li tissepara
Skont il-piż molekulari tal-proteina fil-mira tiegħek, jekk hija proteina b'piż molekulari akbar ('il fuq minn 60KD), tista 'tuża kolla ta' 10%, jekk hija proteina b'piż molekulari bejn 60 u 30kd, tista 'tuża 12 % kolla, u jekk tkun inqas minn 30kd, normalment nuża kolla ta '15%.Il-punt ewlieni huwa li meta l-linja indikatur tispiċċa biss mill-qiegħ tal-gomma, il-proteina fil-mira tiegħek tista 'tkun biss fin-nofs tal-gomma.
Id-daqs tal-pori tal-ġel li jikkorrispondi għal konċentrazzjonijiet differenti ta 'ġel huwa wkoll differenti.Id-daqs tal-pori b'konċentrazzjoni żgħira huwa kbir, u d-daqs tal-pori b'konċentrazzjoni kbira huwa żgħir.Ġeneralment, il-ġel tas-separazzjoni huwa 12% u l-ġel ikkonċentrat huwa 5%, minħabba li l-għan tal-ġell ikkonċentrat huwa li jikkonċentra l-proteini kollha fuq l-istess linja tal-bidu, u mbagħad jidħol fil-ġel tas-separazzjoni għas-separazzjoni.Skont id-daqs tal-proteina.
Ħin tal-post: 05-Settembru 2022
