Forskjellen mellom konsentrert gel og separasjonsgel

dissosiert, og det isoelektriske punktet til Gly er 6,0.Bare noen få er dissosiert til negative ioner, som beveger seg veldig sakte i det elektriske feltet.Sure proteiner dissosieres til negative ioner ved denne pH, og migrasjonshastigheten til de tre typene ioner er cl > Generelle proteiner > Gly.Etter at elektroforesen starter, beveger Cl-ioner seg raskt, og etterlater et område med lav ionekonsentrasjon.Gly beveger seg veldig sakte i det elektriske feltet, noe som resulterer i mangel på bevegelige ioner, så et høyspentområde som mangler ioner dannes mellom raske og langsomme ioner.Alle negative ioner i høyspentområdet vil akselerere deres bevegelse.Når de beveger seg til Cl-ion-regionen, forsvinner høyspenningen, og proteinets bevegelseshastighet avtar.Etter at ovennevnte stabile tilstand er etablert, konsentreres proteinprøven mellom raske og langsomme ioner for å danne et smalt mellomlag. Den er ordnet i bånd i henhold til mengden negativ ladning som bæres av proteinet.Etter at den konsentrerte prøven kommer inn i separasjonsgelen fra den konsentrerte gelen, stiger gelens pH, dissosiasjonsgraden til Gly øker, og mobiliteten øker.Dessuten, fordi molekylet er lite, overgår det alle proteinmolekyler.Umiddelbart etter at Cl-ioner har migrert, eksisterer ikke den lave ionekonsentrasjonen lenger, og danner en konstant elektrisk feltstyrke.Derfor avhenger separasjonen av proteinprøver i separasjonsgelen hovedsakelig av ladningsegenskaper, molekylstørrelse og form.Porestørrelsen til separasjonsgelen har en viss størrelse.For proteiner med forskjellig relativ masse er hystereseeffekten som mottas ved passering forskjellig.Selv partikler med like statiske ladninger vil skille proteiner av forskjellige størrelser fra hverandre på grunn av effekten av denne molekylsikten.

Forskjell mellom 10% og 12% av skillelim

I henhold til molekylvekten til målproteinet ditt, hvis det er et protein med en større molekylvekt (over 60KD), kan du bruke 10% lim, hvis det er et protein med en molekylvekt mellom 60 og 30kd, kan du bruke 12 % lim, og er det lavere enn 30kd bruker jeg vanligvis 15 % lim.Hovedpoenget er at når indikatorlinjen akkurat går ut av gummibunnen, kan målproteinet ditt være akkurat i midten av gummien.

Porestørrelsen på gel som tilsvarer forskjellige konsentrasjoner av gel er også forskjellig.Porestørrelsen med liten konsentrasjon er stor, og porestørrelsen med stor konsentrasjon er liten.Generelt er separasjonsgelen 12 % og den konsentrerte gelen 5 %, fordi formålet med den konsentrerte gelen er å konsentrere alle proteiner på samme startlinje, og deretter gå inn i separasjonsgelen for separasjon.Avhengig av størrelsen på proteinet.