Diferencia entre gel concentrado y gel de separación.

disociado, y el punto isoeléctrico de Gly es 6.0.Solo unos pocos se disocian en iones negativos, que se mueven muy lentamente en el campo eléctrico.Las proteínas ácidas se disocian en iones negativos a este pH, y la tasa de migración de los tres tipos de iones es cl > Proteínas generales > Gly.Después de que comienza la electroforesis, los iones Cl se mueven rápidamente, dejando atrás un área de baja concentración de iones.Gly se mueve muy lentamente en el campo eléctrico, lo que resulta en la falta de iones en movimiento, por lo que se forma una región de alto voltaje que carece de iones entre los iones rápidos y lentos.Todos los iones negativos en la región de alto voltaje acelerarán su movimiento.Cuando se mueven a la región del ion Cl, el alto voltaje desaparece y la velocidad de movimiento de la proteína se ralentiza.Una vez que se establece el estado estable anterior, la muestra de proteína se concentra entre iones rápidos y lentos para formar una capa intermedia estrecha. Se organiza en bandas de acuerdo con la cantidad de carga negativa que lleva la proteína.Después de que la muestra concentrada ingresa al gel de separación del gel concentrado, el pH del gel aumenta, el grado de disociación de Gly aumenta y la movilidad aumenta.Además, debido a que su molécula es pequeña, supera a todas las moléculas de proteína.Inmediatamente después de la migración de los iones Cl, la baja concentración de iones ya no existe, formando un campo eléctrico constante.Por lo tanto, la separación de muestras de proteínas en el gel de separación depende principalmente de sus propiedades de carga, tamaño molecular y forma.El tamaño de poro del gel de separación tiene un tamaño determinado.Para proteínas con diferente masa relativa, el efecto de histéresis recibido al pasar es diferente.Incluso las partículas con cargas estáticas iguales separarán proteínas de diferentes tamaños entre sí debido al efecto de este tamiz molecular.

Diferencia entre 10% y 12% de cola separadora

De acuerdo al peso molecular de tu proteína objetivo, si es una proteína con un peso molecular mayor (superior a 60KD), puedes usar 10% de pegamento, si es una proteína con un peso molecular entre 60 y 30kD, puedes usar 12 % de cola, y si es inferior a 30kd, suelo usar 15% de cola.El punto principal es que cuando la línea indicadora sale del fondo de goma, la proteína objetivo puede estar justo en el medio de la goma.

El tamaño de poro del gel correspondiente a diferentes concentraciones de gel también es diferente.El tamaño de poro con una pequeña concentración es grande y el tamaño de poro con una gran concentración es pequeño.Generalmente, el gel de separación es del 12% y el gel concentrado es del 5%, porque el propósito del gel concentrado es concentrar todas las proteínas en la misma línea de partida y luego ingresar al gel de separación para la separación.Según el tamaño de la proteína.