الفرق بين الجل المركز وجل الفصل

منفصلة ، ونقطة تساوي الكهرباء لـ Gly هي 6.0.يتم تفكيك عدد قليل فقط من الأيونات السالبة ، والتي تتحرك ببطء شديد في المجال الكهربائي.تنفصل البروتينات الحمضية إلى أيونات سالبة عند هذا الرقم الهيدروجيني ، ومعدل هجرة الأنواع الثلاثة من الأيونات هو cl> البروتينات العامة> Gly.بعد بدء الرحلان الكهربائي ، تتحرك أيونات Cl بسرعة ، تاركة وراءها منطقة تركيز أيون منخفض.يتحرك Gly ببطء شديد في المجال الكهربائي ، مما يؤدي إلى نقص الأيونات المتحركة ، لذلك تتشكل منطقة الجهد العالي التي تفتقر إلى الأيونات بين الأيونات السريعة والبطيئة.ستعمل جميع الأيونات السالبة في منطقة الجهد العالي على تسريع حركتها.عندما ينتقلون إلى منطقة Cl ion ، يختفي الجهد العالي ، وتتباطأ سرعة حركة البروتين.بعد إنشاء الحالة المستقرة أعلاه ، تتركز عينة البروتين بين الأيونات السريعة والبطيئة لتشكيل طبقة بينية ضيقة ، يتم ترتيبها في نطاقات وفقًا لكمية الشحنة السالبة التي يحملها البروتين.بعد أن تدخل العينة المركزة هلام الفصل من الجل المركز ، يرتفع الرقم الهيدروجيني للجيل ، وتزداد درجة تفكك Gly ، وترتفع الحركة.علاوة على ذلك ، نظرًا لأن جزيئه صغير ، فهو يتجاوز جميع جزيئات البروتين.مباشرة بعد هجرة أيونات الكلور ، لم يعد التركيز المنخفض للأيونات موجودًا ، مما يشكل قوة مجال كهربائي ثابتة.لذلك ، فإن فصل عينات البروتين في هلام الفصل يعتمد بشكل أساسي على خصائص الشحن والحجم الجزيئي والشكل.حجم مسام هلام الفصل له حجم معين.بالنسبة للبروتينات ذات الكتلة النسبية المختلفة ، يكون تأثير التباطؤ الذي يتم تلقيه عند المرور مختلفًا.حتى الجسيمات ذات الشحنات الساكنة المتساوية ستفصل البروتينات ذات الأحجام المختلفة عن بعضها البعض بسبب تأثير هذا المنخل الجزيئي.

الفرق بين 10٪ و 12٪ لفصل الغراء

وفقًا للوزن الجزيئي للبروتين المستهدف ، إذا كان بروتينًا ذا وزن جزيئي أكبر (أعلى من 60 دينارًا كويتيًا) ، يمكنك استخدام 10٪ غراء ، إذا كان بروتينًا بوزن جزيئي بين 60 و 30 ألفًا ، يمكنك استخدام 12 ٪ الغراء ، وإذا كان أقل من 30kd ، فأنا عادة ما أستخدم 15 ٪ الغراء.النقطة الأساسية هي أنه عندما ينفد خط المؤشر من قاع المطاط ، يمكن أن يكون البروتين المستهدف في منتصف المطاط.

يختلف حجم مسام الجل المقابلة لتركيزات مختلفة من الجل أيضًا.حجم المسام مع التركيز الصغير كبير ، وحجم المسام بتركيز كبير صغير.بشكل عام ، يكون هلام الفصل 12٪ والجيل المركز 5٪ ، لأن الغرض من الجل المركز هو تركيز جميع البروتينات على نفس خط البداية ، ثم إدخال هلام الفصل للفصل.حسب حجم البروتين.