تفاوت بین ژل غلیظ و ژل جداسازی

جدا شده و نقطه ایزوالکتریک Gly 6.0 است.فقط تعداد کمی از آنها به یون های منفی تجزیه می شوند که در میدان الکتریکی بسیار آهسته حرکت می کنند.پروتئین های اسیدی در این pH به یون های منفی تفکیک می شوند و سرعت مهاجرت سه نوع یون cl > پروتئین های عمومی > Gly است.پس از شروع الکتروفورز، یون‌های کلر به سرعت حرکت می‌کنند و ناحیه‌ای با غلظت یون پایین باقی می‌مانند.Gly در میدان الکتریکی بسیار آهسته حرکت می‌کند و در نتیجه یون‌های متحرک کم می‌شوند، بنابراین یک منطقه ولتاژ بالا فاقد یون بین یون‌های سریع و کند تشکیل می‌شود.تمام یون های منفی در ناحیه ولتاژ بالا حرکت خود را تسریع می کنند.هنگامی که آنها به منطقه یون کلر می روند، ولتاژ بالا ناپدید می شود و سرعت حرکت پروتئین کاهش می یابد.پس از برقراری حالت پایدار فوق، نمونه پروتئین بین یون های سریع و آهسته متمرکز می شود تا یک لایه میانی باریک تشکیل شود، بر اساس میزان بار منفی حمل شده توسط پروتئین به نوارهایی مرتب می شود.پس از ورود نمونه غلیظ به ژل جداسازی از ژل غلیظ، pH ژل افزایش می یابد، درجه تفکیک Gly افزایش می یابد و تحرک بالا می رود.علاوه بر این، از آنجا که مولکول آن کوچک است، از همه مولکول های پروتئین فراتر می رود.بلافاصله پس از مهاجرت یون های کلر، غلظت یون پایین دیگر وجود ندارد و یک قدرت میدان الکتریکی ثابت را تشکیل می دهد.بنابراین، جداسازی نمونه‌های پروتئین در ژل جداسازی عمدتاً به ویژگی‌های بار، اندازه مولکولی و شکل آن بستگی دارد.اندازه منافذ ژل جداسازی اندازه مشخصی دارد.برای پروتئین هایی با جرم نسبی متفاوت، اثر هیسترزیس دریافتی هنگام عبور متفاوت است.حتی ذرات با بارهای ساکن مساوی به دلیل تأثیر این غربال مولکولی، پروتئین هایی با اندازه های مختلف را از یکدیگر جدا می کنند.

تفاوت بین 10% و 12% چسب جدا کننده

با توجه به وزن مولکولی پروتئین مورد نظر شما، اگر پروتئینی با وزن مولکولی بزرگتر (بالای 60 کیلو دالتون) باشد، می توانید از چسب 10 درصد استفاده کنید، اگر پروتئینی با وزن مولکولی بین 60 تا 30 کیلو دالتون باشد، می توانید از 12 استفاده کنید. % چسب و اگر کمتر از 30 کیلو دالتون باشه معمولا از چسب 15 درصد استفاده میکنم.نکته اصلی این است که وقتی خط نشانگر فقط از کف لاستیکی خارج می شود، پروتئین مورد نظر شما می تواند درست در وسط لاستیک باشد.

اندازه منافذ ژل مربوط به غلظت های مختلف ژل نیز متفاوت است.اندازه منافذ با غلظت کم بزرگ است و اندازه منافذ با غلظت زیاد کوچک است.به طور کلی ژل جداسازی 12 درصد و ژل غلیظ 5 درصد است زیرا هدف از ژل غلیظ این است که تمام پروتئین ها را در یک خط شروع متمرکز کند و سپس برای جداسازی وارد ژل جداسازی شود.بسته به اندازه پروتئین.