Разлика помеѓу концентриран гел и гел за сепарација

дисоцирана, а изоелектричната точка на Gly е 6,0.Само неколку се дисоцирани во негативни јони, кои се движат многу бавно во електричното поле.Киселите протеини се дисоцираат во негативни јони на оваа pH вредност, а стапката на миграција на трите типа на јони е cl > Општи протеини > Gly.Откако ќе започне електрофорезата, јоните на Cl се движат брзо, оставајќи област со мала концентрација на јони зад себе.Gly се движи многу бавно во електричното поле, што резултира со недостаток на подвижни јони, така што високонапонскиот регион на кој му недостасуваат јони се формира помеѓу брзите и бавните јони.Сите негативни јони во високонапонскиот регион ќе го забрзаат нивното движење.Кога ќе се преселат во јонскиот регион Cl, високиот напон исчезнува, а брзината на движење на протеинот се забавува.Откако ќе се воспостави горенаведената стабилна состојба, протеинскиот примерок се концентрира помеѓу брзите и бавните јони за да се формира тесен меѓуслој.Откако концентрираниот примерок ќе влезе во гелот за одвојување од концентрираниот гел, pH вредноста на гелот се зголемува, степенот на дисоцијација на Gly се зголемува и мобилноста се зголемува.Покрај тоа, бидејќи неговата молекула е мала, таа ги надминува сите протеински молекули.Веднаш по мигрирањето на јоните на Cl, ниската концентрација на јони повеќе не постои, формирајќи константна јачина на електричното поле.Затоа, одвојувањето на протеинските примероци во гелот за сепарација главно зависи од неговите својства на полнење, молекуларната големина и обликот.Големината на порите на гелот за одвојување има одредена големина.За протеините со различна релативна маса, ефектот на хистереза ​​добиен при поминување е различен.Дури и честичките со еднакви статички полнежи ќе ги одделат протеините со различна големина едни од други поради ефектот на ова молекуларно сито.

Разлика помеѓу 10% и 12% на лепак за одвојување

Според молекуларната тежина на целниот протеин, ако е протеин со поголема молекуларна тежина (над 60 KD), можете да користите 10% лепак, ако е протеин со молекуларна тежина помеѓу 60 и 30 kd, можете да користите 12 % лепак, а ако е помал од 30кд најчесто користам лепак од 15%.Главната поента е дека кога индикаторската линија штотуку истекува од гуменото дно, вашиот целен протеин може да биде само во средината на гумата.

Големината на порите на гелот што одговара на различни концентрации на гел е исто така различна.Големината на порите со мала концентрација е голема, а големината на порите со голема концентрација е мала.Генерално, гелот за сепарација е 12%, а концентрираниот гел е 5%, бидејќи целта на концентрираниот гел е да ги концентрира сите протеини на истата почетна линија, а потоа да влезе во гелот за сепарација за сепарација.Во зависност од големината на протеинот.