Skirtumas tarp koncentruoto gelio ir atskyrimo gelio

disocijuotas, o Gly izoelektrinis taškas yra 6,0.Tik keli jų yra disocijuoti į neigiamus jonus, kurie elektriniame lauke juda labai lėtai.Esant tokiam pH, rūgštiniai baltymai suskaidomi į neigiamus jonus, o trijų tipų jonų migracijos greitis yra cl > Bendrieji baltymai > Gly.Prasidėjus elektroforezei, Cl jonai greitai juda, palikdami mažos jonų koncentracijos sritį.Gly elektriniame lauke juda labai lėtai, todėl trūksta judančių jonų, todėl tarp greitųjų ir lėtųjų jonų susidaro aukštos įtampos sritis, kurioje trūksta jonų.Visi neigiami jonai aukštos įtampos srityje pagreitins jų judėjimą.Kai jie pereina į Cl jonų sritį, aukšta įtampa išnyksta, o baltymo judėjimo greitis sulėtėja.Nustačius aukščiau nurodytą stabilią būseną, baltymo mėginys koncentruojamas tarp greitųjų ir lėtųjų jonų, kad susidarytų siauras tarpsluoksnis. Jis suskirstomas į juostas pagal baltymo nešamo neigiamo krūvio kiekį.Koncentruotam mėginiui patekus į atskyrimo gelį nuo koncentruoto gelio, pakyla gelio pH, didėja Gly disociacijos laipsnis ir mobilumas.Be to, kadangi jo molekulė yra maža, ji lenkia visas baltymų molekules.Iš karto po Cl jonų migracijos mažos jonų koncentracijos nebelieka, todėl susidaro pastovus elektrinio lauko stiprumas.Todėl baltymų mėginių atskyrimas atskyrimo gelyje daugiausia priklauso nuo jo krūvio savybių, molekulinio dydžio ir formos.Atskyrimo gelio porų dydis turi tam tikrą dydį.Skirtingos santykinės masės baltymams histerezės efektas, gaunamas praeinant, skiriasi.Net dalelės, turinčios vienodą statinį krūvį, dėl šio molekulinio sieto poveikio atskirs skirtingų dydžių baltymus.

Skirtumas tarp 10% ir 12% skiriamųjų klijų

Pagal tikslinio baltymo molekulinę masę, jei tai yra didesnės molekulinės masės baltymas (daugiau nei 60 kD), galite naudoti 10 % klijų, jei tai baltymas, kurio molekulinė masė nuo 60 iki 30 kd, galite naudoti 12 % klijų, o jei mažesnis nei 30kd, tai dažniausiai naudoju 15 % klijus.Svarbiausia yra tai, kad kai indikatoriaus linija tiesiog baigiasi guminiame dugne, jūsų tikslinis baltymas gali būti tik gumos viduryje.

Gelio porų dydis, atitinkantis skirtingas gelio koncentracijas, taip pat skiriasi.Mažos koncentracijos porų dydis yra didelis, o didelės koncentracijos porų dydis yra mažas.Paprastai atskyrimo gelis yra 12%, o koncentruotas gelis - 5%, nes koncentruoto gelio tikslas yra sukoncentruoti visus baltymus toje pačioje pradinėje linijoje ir tada patekti į atskyrimo gelį atskyrimui.Priklausomai nuo baltymo dydžio.