Gel kontzentratuaren eta bereizteko gelaren arteko aldea

disoziatuta, eta Gly-ren puntu isoelektrikoa 6,0 da.Gutxi batzuk bakarrik ioi negatiboetan disoziatzen dira, eremu elektrikoan oso poliki mugitzen direnak.Proteina azidoak ioi negatiboetan disoziatzen dira pH honetan, eta hiru ioi moten migrazio-tasa cl > Proteina orokorrak > Gly da.Elektroforesia hasi ondoren, Cl ioiak azkar mugitzen dira, ioien kontzentrazio baxuko eremua atzean utziz.Gly oso poliki mugitzen da eremu elektrikoan, eta, ondorioz, ioi mugikorren falta da, beraz, ioirik gabeko tentsio handiko eskualde bat sortzen da ioi azkarren eta motelen artean.Tentsio handiko eskualdeko ioi negatibo guztiek mugimendua bizkortuko dute.Cl ioien eskualdera mugitzen direnean, tentsio altua desagertzen da, eta proteinaren mugimendu-abiadura moteldu egiten da.Goiko egoera egonkorra ezarri ondoren, proteina lagina ioi bizkor eta motelen artean kontzentratzen da, geruza estu bat osatzeko. Bandetan antolatzen da proteinak daraman karga negatibo kopuruaren arabera.Lagin kontzentratua gel kontzentratuaren bereizketa gelan sartu ondoren, gelaren pH-a igotzen da, Gly-ren disoziazio-maila handitzen da eta mugikortasuna igotzen da.Gainera, bere molekula txikia denez, proteina molekula guztiak gainditzen ditu.Cl ioiak migratu eta berehala, ioien kontzentrazio baxua ez da existitzen, eremu elektrikoaren indar konstantea osatuz.Hori dela eta, bereizketa gelan proteina laginak bereiztea bere karga propietateen, tamaina molekularren eta formaren araberakoa da batez ere.Bereizketa gelaren poroen tamainak tamaina jakin bat du.Masa erlatibo desberdina duten proteinen kasuan, pasatzean jasotzen den histeresi efektua ezberdina da.Karga estatiko berdina duten partikulek ere tamaina ezberdineko proteinak elkarrengandik bereiziko dituzte bahe molekular honen eraginez.

Kola bereizgarriaren %10 eta %12 arteko aldea

Zure xede proteinaren pisu molekularraren arabera, pisu molekular handiagoa duen proteina bat bada (60KDtik gorakoa), %10eko kola erabil dezakezu, 60 eta 30kd arteko pisu molekularra duen proteina bat bada, 12 erabil dezakezu. % kola, eta 30kd baino txikiagoa bada, %15eko kola erabiltzen dut normalean.Puntu nagusia da adierazle-lerroa gomazko hondotik agortzen denean, zure xede-proteina kautxuaren erdian egon daitekeela.

Gelaren kontzentrazio desberdinei dagokien gelaren poroen tamaina ere desberdina da.Kontzentrazio txikia duten poroen tamaina handia da eta kontzentrazio handia duten poroen tamaina txikia da.Orokorrean, bereizketa gela % 12koa da eta gel kontzentratua % 5ekoa da, gel kontzentratuaren helburua proteina guztiak hasierako lerro berean kontzentratzea baita, eta gero bereizketa gelan sartu bereizteko.Proteinaren tamainaren arabera.