ব্যবহার করুনবিচ্ছেদ আঠালো
ব্যবহার এবং সাধারণ সমস্যা:
1) ফিল্টার পেপার, আঠা এবং ঝিল্লির মাপ সাধারণত ফিল্টার পেপার > = মেমব্রেন > = আঠা।
2) ফিল্টার পেপার, আঠা এবং ঝিল্লির মধ্যে কোনও বুদবুদ থাকবে না, যা শর্ট সার্কিটের কারণ হবে।
3) ঝিল্লির হাইড্রোফোবিসিটির কারণে, ঝিল্লিটি প্রথমে মিথানলে সম্পূর্ণরূপে ভেজাতে হবে।উপরন্তু, পরবর্তী অপারেশনে (শুষ্ক ফিল্ম পদ্ধতি ব্যতীত) ফিল্মটি সর্বদা ভেজা রাখতে হবে।
4) ফিল্টার পেপার পুনরায় ব্যবহার করা যেতে পারে।উপরের ফিল্টার পেপারে (মেমব্রেনে) অনেক স্থানান্তরিত প্রোটিন শোষিত হয়, তাই উপরের এবং নীচের ফিল্টার পেপারগুলিকে মিশ্রিত করা উচিত নয়।যদি তাদের আলাদা করা না যায় তবে রাবার ফিল্টার পেপার প্রতিস্থাপন করা যেতে পারে।
5) স্থানান্তর সময় সাধারণত 1.5 ঘন্টা, (1ma-2ma / cm2, 10% জেল), এবং স্থানান্তর সময় এবং বর্তমান আণবিক ওজন অনুযায়ী সামঞ্জস্য করা যেতে পারে।
1) যখন লেমিনেটিং ফিল্ম, আঠালো এবং কাগজের স্যান্ডউইচ, একটি ঘূর্ণনশীল ফিল্ম বাফার সহ একটি বড় প্লেটে কাজ করুন।স্ট্যাকিংয়ের পরে, তিনটিকে সমান্তরালভাবে ঘূর্ণায়মান ফিল্ম ডিভাইসে স্থানান্তর করুন।এগুলিকে আর নাড়াবেন না, কারণ বাফারে কাজ করার মাধ্যমে বুদবুদের সম্ভাবনা সম্পূর্ণরূপে বাদ দেওয়া হয়েছে, তাই বুদবুদ চালানোর দরকার নেই
2) ফিল্ম স্থানান্তর সময় সম্পর্কে: আধা শুকনো ঘূর্ণনের জন্য 20 V × 30 মিনিট
(b) ভেজা পদ্ধতি
আমরা মূলত এই পদ্ধতিটি ব্যবহার করি না, তাই আমরা এটি এখানে উপস্থাপন করব না।
মেটাস্টেসিসের পরে প্রভাবের সি সনাক্তকরণ
1. আঠালো রঞ্জনবিদ্যা
Coomassie ব্রিলিয়ান্ট ব্লু দিয়ে দাগ দেওয়ার পরে এবং Destain এর সাথে রঙিন করার পরে, স্থানান্তরের প্রভাব প্রতিফলিত করার জন্য আঠালোতে প্রোটিন আছে কিনা তা দেখুন।
2. ডাই ফিল্ম
দুটি ধরণের রঞ্জক সমাধান রয়েছে, বিপরীত এবং অপরিবর্তনীয়।উল্টানো যায় এমনগুলির মধ্যে রয়েছে পোনসেউ-এস রেড, ফাস্টগ্রিন এফসি, সিপিটি ইত্যাদি। এই রঞ্জকগুলি দিয়ে রঙ করার পরে, রঙ্গকটি ধুয়ে যেতে পারে এবং ঝিল্লিটি আরও বিশ্লেষণের জন্য ব্যবহার করা যেতে পারে।কিন্তু অপরিবর্তনীয় রঞ্জক, যেমন Coomassie ব্রিলিয়ান্ট ব্লু, ইন্ডিয়া ইঙ্ক, amido Black 10B, ইত্যাদি, এবং দাগযুক্ত ফিল্ম আরও বিশ্লেষণের জন্য ব্যবহার করা যাবে না।
পোস্টের সময়: সেপ্টেম্বর-০৯-২০২২
