Gebruikscheiding lijm
oplossingen en veelvoorkomende problemen:
1) De maat tussen filtreerpapier, lijm en membraan is over het algemeen filterpapier > = membraan > = lijm.
2) Tussen filtreerpapier, lijm en membraan mogen zich geen luchtbellen bevinden die kortsluiting kunnen veroorzaken.
3) Vanwege de hydrofobiciteit van het membraan moet het membraan eerst volledig worden bevochtigd met methanol.Bovendien moet de film tijdens de daaropvolgende bewerking te allen tijde nat worden gehouden (behalve de droge filmmethode).
4) Het filterpapier kan opnieuw worden gebruikt.Er zijn veel overgedragen eiwitten geadsorbeerd in het bovenste filterpapier (membraan), dus het bovenste en onderste filterpapier mogen niet worden gemengd.Als ze niet kunnen worden onderscheiden, kan het rubberen filterpapier worden vervangen.
5) De overdrachtstijd is over het algemeen 1,5 uur (1ma-2ma / cm2, 10% gel), en de overdrachtstijd en stroom kunnen worden aangepast aan het molecuulgewicht.
1) Werk bij het lamineren van films, lijm en papiersandwiches op een grote plaat met een roterende filmbuffer.Breng de drie na het stapelen parallel over naar het roterende filmapparaat.Verplaats ze niet meer, want de mogelijkheid van bellen is volledig geëlimineerd door in de buffer te werken, dus het is niet nodig om bellen te drijven
2) Over filmoverdrachtstijd: 20 V voor halfdroge rotatie × 30 min
(b) natte methode
We gebruiken deze methode in principe niet, dus we zullen het hier niet introduceren.
C identificatie van effect na metastase
1. Lijm verven
Na kleuren met Coomassie brilliant blue en ontkleuren met Destain, kijken of er nog eiwit op de lijm zit om het effect van transfer weer te geven.
2. Kleurstoffilm
Er zijn twee soorten kleurstofoplossingen, omkeerbaar en onomkeerbaar.Omkeerbare zijn onder meer ponceau-s rood, fastgreen FC, CPT's, enz. Na het verven met deze kleurstoffen kan het pigment worden weggewassen en kan het membraan worden gebruikt voor verdere analyse.Maar onomkeerbare kleurstoffen, zoals Coomassie brilliant blue, Oost-Indische inkt, amido Black 10B, enz., en de gekleurde film kunnen niet worden gebruikt voor verdere analyse.
Posttijd: 09-09-2022
