Uzudisiga gluo
ucioj kaj oftaj problemoj:
1) La grandeco inter filtrila papero, gluo kaj membrano estas ĝenerale filtrila papero > = membrano > = gluo.
2) Ne devas esti vezikoj inter filtrila papero, gluo kaj membrano, kio kaŭzos kurtcirkviton.
3) Pro la hidrofobeco de la membrano, la membrano unue devas esti tute malsekigita en metanolo.Krome, la filmo devas esti konservita malseka ĉiam en la posta operacio (krom la seka filmmetodo).
4) La filtrila papero povas esti reuzita.Estas multaj transigitaj proteinoj adsorbitaj en la supra filtrila papero (membrano), do la supraj kaj malsupraj filtrilaj paperoj ne devas esti miksitaj.Se ili ne povas esti distingitaj, la kaŭĉuka filtrila papero povas esti anstataŭigita.
5) La transiga tempo estas ĝenerale 1.5 horoj, (1ma-2ma / cm2, 10% ĝelo), kaj la transiga tempo kaj fluo povas esti ĝustigitaj laŭ la molekula pezo.
1) Kiam laminado de filmo, gluo kaj paperaj sandviĉoj, funkciigu en granda telero kun turnanta filmbufro.Post stakiĝo, translokigu la tri al la rotacianta filma aparato paralele.Ne movu ilin plu, ĉar la ebleco de vezikoj estis tute forigita per funkciado en la bufro, do ne necesas veturi vezikojn.
2) Pri filma transiga tempo: 20 V por duonseka rotacio × 30min
(b) malseka metodo
Ni esence ne uzas ĉi tiun metodon, do ni ne enkondukos ĝin ĉi tie.
C identigo de efiko post metastazo
1. Glua tinkturado
Post makulado per Coomassie brila bluo kaj senkolorigado per Destain, vidu ĉu ankoraŭ estas proteino sur la gluo por reflekti la efikon de translokigo.
2. Tinktura filmo
Estas du specoj de tinkturfarboj, reigeblaj kaj nemaligeblaj.Reigeblaj inkluzivas ponceau-s-ruĝajn, fastgreen FC, CPTojn, ktp. post tinkturfarado per ĉi tiuj tinkturfarboj, la pigmento povas esti forlavita, kaj la membrano povas esti uzata por plia analizo.Sed neinversigeblaj tinkturfarboj, kiel ekzemple Coomassie brila bluo, hinda inko, amido Black 10B, ktp., kaj la makulita filmo ne povas esti uzataj por plia analizo.
Afiŝtempo: Sep-09-2022
