gunagam pemisah
masalah dan masalah biasa:
1) Saiz antara kertas turas, gam dan membran secara amnya ialah kertas turas > = membran > = gam.
2) Tidak boleh ada gelembung antara kertas penapis, gam dan membran, yang akan menyebabkan litar pintas.
3) Kerana hidrofobisiti membran, membran mesti terlebih dahulu dibasahi sepenuhnya dalam metanol.Di samping itu, filem mesti sentiasa basah sepanjang masa dalam operasi berikutnya (kecuali kaedah filem kering).
4) Kertas turas boleh digunakan semula.Terdapat banyak protein yang dipindahkan terserap dalam kertas penapis atas (membran), jadi kertas penapis atas dan bawah tidak boleh dicampur.Jika mereka tidak dapat dibezakan, kertas penapis getah boleh diganti.
5) Masa pemindahan biasanya 1.5 jam, (1ma-2ma / cm2, 10% gel), dan masa pemindahan dan arus boleh diselaraskan mengikut berat molekul.
1) Apabila melapis filem, gam dan sandwic kertas, beroperasi dalam pinggan besar dengan penimbal filem berputar.Selepas menyusun, pindahkan ketiga-tiga ke peranti filem berputar secara selari.Jangan gerakkannya lagi, kerana kemungkinan buih telah dihapuskan sepenuhnya dengan beroperasi dalam penampan, jadi tidak perlu memacu buih
2) Mengenai masa pemindahan filem: 20 V untuk putaran separuh kering × 30min
(b) kaedah basah
Kami pada dasarnya tidak menggunakan kaedah ini, jadi kami tidak akan memperkenalkannya di sini.
C pengenalpastian kesan selepas metastasis
1. Mewarna gam
Selepas mewarna dengan Coomassie biru cemerlang dan menyahwarna dengan Destain, lihat sama ada masih terdapat protein pada gam untuk mencerminkan kesan pemindahan.
2. Filem pewarna
Terdapat dua jenis larutan pewarna, boleh balik dan tidak boleh balik.Yang boleh diterbalikkan termasuk ponceau-s merah, fastgreen FC, CPT, dll. selepas pencelupan dengan pewarna ini, pigmen boleh dihanyutkan, dan membran boleh digunakan untuk analisis lanjut.Tetapi pewarna tak boleh balik, seperti Coomassie brilliant blue, India ink, amido Black 10B, dsb., dan filem bernoda tidak boleh digunakan untuk analisis lanjut.
Masa siaran: Sep-09-2022
