ಬಳಸಿಬೇರ್ಪಡಿಸುವ ಅಂಟು
ಬಳಕೆಗಳು ಮತ್ತು ಸಾಮಾನ್ಯ ಸಮಸ್ಯೆಗಳು:
1) ಫಿಲ್ಟರ್ ಪೇಪರ್, ಅಂಟು ಮತ್ತು ಪೊರೆಯ ನಡುವಿನ ಗಾತ್ರವು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಫಿಲ್ಟರ್ ಪೇಪರ್ > = ಮೆಂಬರೇನ್ > = ಅಂಟು.
2) ಫಿಲ್ಟರ್ ಪೇಪರ್, ಅಂಟು ಮತ್ತು ಮೆಂಬರೇನ್ ನಡುವೆ ಯಾವುದೇ ಗುಳ್ಳೆಗಳು ಇರಬಾರದು, ಅದು ಶಾರ್ಟ್ ಸರ್ಕ್ಯೂಟ್ಗೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ.
3) ಪೊರೆಯ ಹೈಡ್ರೋಫೋಬಿಸಿಟಿಯ ಕಾರಣ, ಮೆಂಬರೇನ್ ಅನ್ನು ಮೊದಲು ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಮೆಥನಾಲ್ನಲ್ಲಿ ತೇವಗೊಳಿಸಬೇಕು.ಹೆಚ್ಚುವರಿಯಾಗಿ, ನಂತರದ ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆಯಲ್ಲಿ (ಡ್ರೈ ಫಿಲ್ಮ್ ವಿಧಾನವನ್ನು ಹೊರತುಪಡಿಸಿ) ಎಲ್ಲಾ ಸಮಯದಲ್ಲೂ ಫಿಲ್ಮ್ ತೇವವಾಗಿರಬೇಕು.
4) ಫಿಲ್ಟರ್ ಪೇಪರ್ ಅನ್ನು ಮರುಬಳಕೆ ಮಾಡಬಹುದು.ಮೇಲಿನ ಫಿಲ್ಟರ್ ಪೇಪರ್ನಲ್ಲಿ (ಮೆಂಬರೇನ್) ಹೀರಿಕೊಳ್ಳಲ್ಪಟ್ಟ ಅನೇಕ ವರ್ಗಾವಣೆಗೊಂಡ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳಿವೆ, ಆದ್ದರಿಂದ ಮೇಲಿನ ಮತ್ತು ಕೆಳಗಿನ ಫಿಲ್ಟರ್ ಪೇಪರ್ಗಳನ್ನು ಮಿಶ್ರಣ ಮಾಡಬಾರದು.ಅವುಗಳನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಾಗದಿದ್ದರೆ, ರಬ್ಬರ್ ಫಿಲ್ಟರ್ ಪೇಪರ್ ಅನ್ನು ಬದಲಾಯಿಸಬಹುದು.
5) ವರ್ಗಾವಣೆ ಸಮಯವು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ 1.5 ಗಂಟೆಗಳು, (1ma-2ma / cm2, 10% ಜೆಲ್), ಮತ್ತು ವರ್ಗಾವಣೆ ಸಮಯ ಮತ್ತು ಪ್ರವಾಹವನ್ನು ಆಣ್ವಿಕ ತೂಕದ ಪ್ರಕಾರ ಸರಿಹೊಂದಿಸಬಹುದು.
1) ಫಿಲ್ಮ್, ಅಂಟು ಮತ್ತು ಕಾಗದದ ಸ್ಯಾಂಡ್ವಿಚ್ಗಳನ್ನು ಲ್ಯಾಮಿನೇಟ್ ಮಾಡುವಾಗ, ತಿರುಗುವ ಫಿಲ್ಮ್ ಬಫರ್ನೊಂದಿಗೆ ದೊಡ್ಡ ಪ್ಲೇಟ್ನಲ್ಲಿ ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸಿ.ಪೇರಿಸಿದ ನಂತರ, ಮೂರನ್ನು ಸಮಾನಾಂತರವಾಗಿ ತಿರುಗುವ ಫಿಲ್ಮ್ ಸಾಧನಕ್ಕೆ ವರ್ಗಾಯಿಸಿ.ಅವುಗಳನ್ನು ಇನ್ನು ಮುಂದೆ ಚಲಿಸಬೇಡಿ, ಏಕೆಂದರೆ ಬಫರ್ನಲ್ಲಿ ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸುವ ಮೂಲಕ ಗುಳ್ಳೆಗಳ ಸಾಧ್ಯತೆಯನ್ನು ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ತೆಗೆದುಹಾಕಲಾಗಿದೆ, ಆದ್ದರಿಂದ ಗುಳ್ಳೆಗಳನ್ನು ಓಡಿಸುವ ಅಗತ್ಯವಿಲ್ಲ
2) ಫಿಲ್ಮ್ ವರ್ಗಾವಣೆ ಸಮಯದ ಬಗ್ಗೆ: ಅರೆ ಒಣ ತಿರುಗುವಿಕೆಗೆ 20 ವಿ × 30 ನಿಮಿಷ
(ಬಿ) ಆರ್ದ್ರ ವಿಧಾನ
ನಾವು ಮೂಲತಃ ಈ ವಿಧಾನವನ್ನು ಬಳಸುವುದಿಲ್ಲ, ಆದ್ದರಿಂದ ನಾವು ಅದನ್ನು ಇಲ್ಲಿ ಪರಿಚಯಿಸುವುದಿಲ್ಲ.
ಮೆಟಾಸ್ಟಾಸಿಸ್ ನಂತರ ಪರಿಣಾಮದ ಸಿ ಗುರುತಿಸುವಿಕೆ
1. ಅಂಟು ಬಣ್ಣ
Coomassie ಬ್ರಿಲಿಯಂಟ್ ನೀಲಿ ಬಣ್ಣ ಮತ್ತು Destain ಜೊತೆ ಬಣ್ಣಬಣ್ಣದ ನಂತರ, ವರ್ಗಾವಣೆಯ ಪರಿಣಾಮವನ್ನು ಪ್ರತಿಬಿಂಬಿಸಲು ಅಂಟು ಮೇಲೆ ಇನ್ನೂ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಇದೆಯೇ ಎಂದು ನೋಡಿ.
2. ಡೈ ಫಿಲ್ಮ್
ಎರಡು ರೀತಿಯ ಡೈ ದ್ರಾವಣಗಳಿವೆ, ಹಿಂತಿರುಗಿಸಬಹುದಾದ ಮತ್ತು ಬದಲಾಯಿಸಲಾಗದ.ಹಿಂತಿರುಗಿಸಬಹುದಾದವುಗಳು ಪೊನ್ಸೌ-ರು ಕೆಂಪು, ಫಾಸ್ಟ್ಗ್ರೀನ್ ಎಫ್ಸಿ, ಸಿಪಿಟಿಗಳು, ಇತ್ಯಾದಿಗಳನ್ನು ಈ ಬಣ್ಣಗಳೊಂದಿಗೆ ಬಣ್ಣ ಮಾಡಿದ ನಂತರ, ವರ್ಣದ್ರವ್ಯವನ್ನು ತೊಳೆದುಕೊಳ್ಳಬಹುದು ಮತ್ತು ಹೆಚ್ಚಿನ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗಾಗಿ ಪೊರೆಯನ್ನು ಬಳಸಬಹುದು.ಆದರೆ ಬದಲಾಯಿಸಲಾಗದ ಬಣ್ಣಗಳಾದ ಕೂಮಾಸ್ಸಿ ಬ್ರಿಲಿಯಂಟ್ ಬ್ಲೂ, ಇಂಡಿಯಾ ಇಂಕ್, ಅಮಿಡೋ ಬ್ಲ್ಯಾಕ್ 10 ಬಿ, ಇತ್ಯಾದಿ ಮತ್ತು ಬಣ್ಣದ ಫಿಲ್ಮ್ ಅನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿನ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುವುದಿಲ್ಲ.
ಪೋಸ್ಟ್ ಸಮಯ: ಸೆಪ್ಟೆಂಬರ್-09-2022