Käyttääerotusliima
ongelmat ja yleiset ongelmat:
1) Suodatinpaperin, liiman ja kalvon välinen koko on yleensä suodatinpaperi > = kalvo > = liima.
2) Suodatinpaperin, liiman ja kalvon välissä ei saa olla kuplia, jotka aiheuttavat oikosulun.
3) Kalvon hydrofobisuuden vuoksi kalvo on ensin kostutettava kokonaan metanolissa.Lisäksi kalvo on pidettävä koko ajan märkänä myöhemmissä toiminnoissa (paitsi kuivakalvomenetelmää).
4) Suodatinpaperia voidaan käyttää uudelleen.Ylempään suodatinpaperiin (kalvoon) on adsorboitunut monia siirrettyjä proteiineja, joten ylempää ja alempaa suodatinpaperia ei saa sekoittaa.Jos niitä ei voida erottaa, kuminen suodatinpaperi voidaan vaihtaa.
5) Siirtoaika on yleensä 1,5 tuntia (1ma-2ma / cm2, 10% geeliä), ja siirtoaikaa ja virtaa voidaan säätää molekyylipainon mukaan.
1) Kun laminaat kalvoa, liimaa ja paperivoileipiä, käytä suuressa levyssä, jossa on pyörivä kalvopuskuri.Pinoamisen jälkeen siirrä kolme pyörivään kalvolaitteeseen rinnakkain.Älä siirrä niitä enää, koska puskurissa toimiminen on eliminoitu täysin kuplien mahdollisuus, joten kuplia ei tarvitse ajaa
2) Tietoja kalvon siirtoajasta: 20 V puolikuivaan pyörimiseen × 30 min
b) märkämenetelmä
Emme periaatteessa käytä tätä menetelmää, joten emme esittele sitä tässä.
C vaikutuksen tunnistaminen metastaasin jälkeen
1. Liimavärjäys
Kun olet värjännyt Coomassie briljantinsinisellä ja poistanut värin Destainilla, katso, onko liimassa vielä proteiinia, joka kuvastaa siirtymisen vaikutusta.
2. Värikalvo
Väriaineliuoksia on kahdenlaisia, reversiibelit ja irreversiibelit.Kääntyviä ovat ponceau-s red, fastgreen FC, CPT jne. Näillä väreillä värjäyksen jälkeen pigmentti voidaan pestä pois ja kalvoa voidaan käyttää lisäanalyyseihin.Mutta peruuttamattomia väriaineita, kuten Coomassie briljanttisinistä, Intian mustetta, amido Black 10B:tä jne., ja värjättyä kalvoa ei voida käyttää lisäanalyyseihin.
Postitusaika: 9.9.2022
