Gebruikskeiding gom
aksies en algemene probleme:
1) Die grootte tussen filtreerpapier, gom en membraan is gewoonlik filtreerpapier > = membraan > = gom.
2) Daar mag geen borrels tussen filtreerpapier, gom en membraan wees nie, wat kortsluiting sal veroorsaak.
3) As gevolg van die hidrofobisiteit van die membraan, moet die membraan eers heeltemal benat word in metanol.Daarbenewens moet die film te alle tye nat gehou word in die daaropvolgende operasie (behalwe vir die droëfilmmetode).
4) Die filtreerpapier kan hergebruik word.Daar is baie oorgedrade proteïene wat in die boonste filtreerpapier (membraan) geadsorbeer word, dus moet die boonste en onderste filtreerpapier nie gemeng word nie.As hulle nie onderskei kan word nie, kan die rubber filtreerpapier vervang word.
5) Die oordragtyd is gewoonlik 1,5 uur, (1ma-2ma / cm2, 10% gel), en die oordragtyd en stroom kan volgens die molekulêre gewig aangepas word.
1) Wanneer film-, gom- en papiertoebroodjies gelamineer word, werk in 'n groot bord met 'n roterende filmbuffer.Na stapeling, dra die drie parallel na die roterende filmtoestel oor.Moenie hulle meer beweeg nie, want die moontlikheid van borrels is heeltemal uitgeskakel deur in die buffer te werk, so dit is nie nodig om borrels aan te dryf nie
2) Oor filmoordragtyd: 20 V vir semi-droë rotasie × 30min
(b) nat metode
Ons gebruik basies nie hierdie metode nie, so ons sal dit nie hier bekendstel nie.
C identifikasie van effek na metastase
1. Gomverf
Nadat u met Coomassie briljantblou gekleur het en met Destain ontkleur het, kyk of daar nog proteïen op die gom is om die effek van oordrag te weerspieël.
2. Kleurfilm
Daar is twee soorte kleurstofoplossings, omkeerbaar en onomkeerbaar.Omkeerbares sluit in ponceau-rooi, vinniggroen FC, CPT's, ens. nadat dit met hierdie kleurstowwe gekleur is, kan die pigment weggewas word, en die membraan kan vir verdere ontleding gebruik word.Maar onomkeerbare kleurstowwe, soos Coomassie briljante blou, Indiese ink, amido Black 10B, ens., en die gekleurde film kan nie vir verdere ontleding gebruik word nie.
Postyd: Sep-09-2022
