Brûkeskieding lijm
en mienskiplike problemen:
1) De grutte tusken filterpapier, lijm en membraan is algemien filterpapier> = membraan> = lijm.
2) D'r moatte gjin bubbels wêze tusken filterpapier, lijm en membraan, wat koartsluting feroarsaakje sil.
3) Fanwege de hydrofobisiteit fan it membraan moat it membraan earst folslein yn methanol wiette wurde.Derneist moat de film yn 'e folgjende operaasje altyd wiet wurde hâlden (útsein foar de droege filmmetoade).
4) It filterpapier kin opnij brûkt wurde.D'r binne in protte oerdroegen aaiwiten adsorbearre yn it boppeste filterpapier (membraan), sadat de boppeste en legere filterpapieren net mingd wurde moatte.As se net te ûnderskieden binne, kin it rubberfilterpapier ferfongen wurde.
5) De oerdracht tiid is algemien 1,5 oeren, (1ma-2ma / cm2, 10% gel), en de oerdracht tiid en aktuele kin oanpast wurde neffens it molekulêre gewicht.
1) By it laminearjen fan film, lijm en papier sandwiches, operearje yn in grutte plaat mei in rotearjende filmbuffer.Nei it stapeljen, oerdrage de trije parallel oan it draaiende filmapparaat.Ferpleats se net mear, om't de mooglikheid fan bubbels folslein elimineare is troch operearjen yn 'e buffer, dus d'r is gjin needsaak om bubbels te riden
2) Oer film oerdracht tiid: 20 V foar semi droege rotaasje × 30min
(b) wiete metoade
Wy brûke dizze metoade yn prinsipe net, dus wy sille it hjir net yntrodusearje.
C identifikaasje fan effekt nei metastasis
1. Lijm ferve
Nei it kleurjen mei Coomassie briljant blau en decolorizing mei Destain, sjoch oft d'r noch proteïne op 'e lijm is om it effekt fan oerdracht te reflektearjen.
2. Dye film
D'r binne twa soarten kleurstofoplossingen, omkearber en ûnomkearber.Omkearbere befetsje ponceau-s read, fastgreen FC, CPTs, ensfh nei ferve mei dizze kleurstoffen, kin it pigment wurde wosken fuort, en it membraan kin brûkt wurde foar fierdere analyze.Mar ûnomkearbere kleurstoffen, lykas Coomassie briljant blau, Yndia inket, amido Black 10B, ensfh, en de kleurde film kin net brûkt wurde foar fierdere analyze.
Post tiid: Sep-09-2022