사용분리 접착제
utions 및 일반적인 문제:
1) 여과지, 풀, 막 사이의 크기는 일반적으로 여과지>=막>=접착제이다.
2) 여과지, 접착제 및 멤브레인 사이에 단락을 일으킬 수 있는 기포가 없어야 합니다.
3) 멤브레인의 소수성 때문에 멤브레인은 먼저 메탄올에 완전히 적셔져야 합니다.또한 필름은 후속 작업에서 항상 젖은 상태로 유지되어야 합니다(드라이 필름 방식 제외).
4) 여과지는 재사용이 가능하다.상부여과지(막)에 흡착된 전이단백질이 많으므로 상부여과지와 하부여과지가 섞이지 않아야 한다.구별할 수 없는 경우 고무 여과지를 교체할 수 있습니다.
5) 이송 시간은 일반적으로 1.5시간(1ma-2ma/cm2, 10% 겔)이며, 이송 시간 및 전류는 분자량에 따라 조절될 수 있다.
1) 필름, 접착제 및 종이 샌드위치를 라미네이팅할 때 회전하는 필름 버퍼가 있는 대형 플레이트에서 작동합니다.쌓은 후 3개를 병렬로 회전하는 필름장치로 옮긴다.더 이상 움직이지 마세요. 버퍼에서 동작하여 기포 발생 가능성이 완전히 제거되었기 때문에 기포를 구동할 필요가 없습니다.
2) 필름 이송 시간에 관하여: 세미 드라이 회전 시 20V × 30분
(b) 습식법
이 방법은 기본적으로 사용하지 않기 때문에 여기서는 소개하지 않겠습니다.
C 전이 후 효과 확인
1. 풀 염색
쿠마시 브릴리언트 블루로 염색하고 Destain으로 탈색한 후 전사 효과를 반영하기 위해 접착제에 여전히 단백질이 있는지 확인합니다.
2. 염료 필름
염료 용액에는 가역성과 비가역성의 두 가지 종류가 있습니다.가역적인 것에는 ponceau-s red, fastgreen FC, CPTs 등이 포함됩니다. 이러한 염료로 염색한 후 안료를 씻어내고 멤브레인을 추가 분석에 사용할 수 있습니다.그러나 쿠마시 브릴리언트 블루, 인디아 잉크, 아미도 블랙 10B 등과 같은 불가역 염료와 스테인드 필름은 추가 분석에 사용할 수 없습니다.
게시 시간: 2022년 9월 9일
