વાપરવુવિભાજન ગુંદર
ઉપયોગો અને સામાન્ય સમસ્યાઓ:
1) ફિલ્ટર પેપર, ગ્લુ અને મેમ્બ્રેન વચ્ચેનું માપ સામાન્ય રીતે ફિલ્ટર પેપર > = મેમ્બ્રેન > = ગુંદર હોય છે.
2) ફિલ્ટર પેપર, ગુંદર અને મેમ્બ્રેન વચ્ચે કોઈ પરપોટા ન હોવા જોઈએ, જેનાથી શોર્ટ સર્કિટ થશે.
3) પટલની હાઇડ્રોફોબિસીટીને કારણે, પટલને પહેલા મિથેનોલમાં સંપૂર્ણપણે ભીનું કરવું આવશ્યક છે.વધુમાં, પછીની કામગીરીમાં (ડ્રાય ફિલ્મ પદ્ધતિ સિવાય) ફિલ્મને હંમેશા ભીની રાખવી જોઈએ.
4) ફિલ્ટર પેપરનો ફરીથી ઉપયોગ કરી શકાય છે.ઉપલા ફિલ્ટર પેપર (મેમ્બ્રેન) માં ઘણા સ્થાનાંતરિત પ્રોટીન શોષાય છે, તેથી ઉપલા અને નીચલા ફિલ્ટર પેપરને મિશ્રિત કરવા જોઈએ નહીં.જો તેઓ ઓળખી શકાતા નથી, તો રબર ફિલ્ટર પેપર બદલી શકાય છે.
5) ટ્રાન્સફર સમય સામાન્ય રીતે 1.5 કલાક, (1ma-2ma/cm2, 10% જેલ), અને ટ્રાન્સફર સમય અને વર્તમાન પરમાણુ વજન અનુસાર ગોઠવી શકાય છે.
1) ફિલ્મ, ગુંદર અને કાગળના સેન્ડવિચને લેમિનેટ કરતી વખતે, ફરતી ફિલ્મ બફર સાથે મોટી પ્લેટમાં ચલાવો.સ્ટેકીંગ કર્યા પછી, ત્રણને સમાંતરમાં ફરતી ફિલ્મ ઉપકરણ પર સ્થાનાંતરિત કરો.તેમને વધુ ખસેડશો નહીં, કારણ કે બફરમાં કામ કરવાથી પરપોટાની શક્યતા સંપૂર્ણપણે દૂર થઈ ગઈ છે, તેથી પરપોટા ચલાવવાની કોઈ જરૂર નથી.
2) ફિલ્મ ટ્રાન્સફર સમય વિશે: અર્ધ શુષ્ક પરિભ્રમણ માટે 20 V × 30 મિનિટ
(b) ભીની પદ્ધતિ
અમે મૂળભૂત રીતે આ પદ્ધતિનો ઉપયોગ કરતા નથી, તેથી અમે તેને અહીં રજૂ કરીશું નહીં.
C મેટાસ્ટેસિસ પછી અસરની ઓળખ
1. ગુંદર ડાઇંગ
Coomassie બ્રિલિયન્ટ બ્લુ સાથે સ્ટેનિંગ કર્યા પછી અને Destain સાથે ડિકોલરાઇઝ કર્યા પછી, ટ્રાન્સફરની અસરને પ્રતિબિંબિત કરવા માટે ગુંદર પર હજુ પણ પ્રોટીન છે કે કેમ તે જુઓ.
2. ડાય ફિલ્મ
ત્યાં બે પ્રકારના રંગ ઉકેલો છે, ઉલટાવી શકાય તેવું અને બદલી ન શકાય તેવું.ઉલટાવી શકાય તેવા રંગોમાં પોન્સો-એસ રેડ, ફાસ્ટગ્રીન એફસી, સીપીટી વગેરેનો સમાવેશ થાય છે. આ રંગો સાથે રંગ કર્યા પછી, રંગદ્રવ્ય ધોવાઇ શકાય છે, અને પટલનો વધુ વિશ્લેષણ માટે ઉપયોગ કરી શકાય છે.પરંતુ બદલી ન શકાય તેવા રંગો, જેમ કે કુમાસી બ્રિલિયન્ટ બ્લુ, ઈન્ડિયા ઈંક, એમીડો બ્લેક 10B, વગેરે, અને સ્ટેઇન્ડ ફિલ્મનો વધુ વિશ્લેષણ માટે ઉપયોગ કરી શકાતો નથી.
પોસ્ટનો સમય: સપ્ટેમ્બર-09-2022
