يستخدمفصل الغراء
الحلول والمشاكل الشائعة:
1) الحجم بين ورق الترشيح والغراء والغشاء هو بشكل عام ورق ترشيح> = غشاء> = غراء.
2) يجب ألا يكون هناك فقاعات بين ورق الترشيح والغراء والغشاء ، مما يؤدي إلى حدوث ماس كهربائي.
3) بسبب كره الغشاء للماء ، يجب أولاً ترطيب الغشاء بالكامل في الميثانول.بالإضافة إلى ذلك ، يجب أن يظل الفيلم رطبًا في جميع الأوقات في العملية اللاحقة (باستثناء طريقة الفيلم الجاف).
4) يمكن إعادة استخدام ورق الترشيح.هناك العديد من البروتينات المنقولة التي يتم امتصاصها في ورق الترشيح العلوي (الغشاء) ، لذلك يجب عدم خلط ورق الترشيح العلوي والسفلي.إذا تعذر التمييز بينهما ، فيمكن استبدال ورق الترشيح المطاطي.
5) يكون وقت النقل بشكل عام 1.5 ساعة (1ma-2ma / cm2 ، 10٪ هلام) ، ويمكن تعديل وقت النقل والتيار وفقًا للوزن الجزيئي.
1) عند تصفيح الفيلم ، الغراء والورق شطائر ، تعمل في لوحة كبيرة مع دوران فيلم عازلة.بعد التكديس ، انقل الثلاثة إلى جهاز الفيلم الدوار بالتوازي.لا تقم بتحريكهم بعد الآن ، لأنه تم القضاء على احتمالية تكون الفقاعات تمامًا من خلال التشغيل في المخزن المؤقت ، لذلك ليست هناك حاجة لقيادة الفقاعات
2) حول وقت نقل الفيلم: 20 فولت للدوران شبه الجاف × 30 دقيقة
(ب) الطريقة الرطبة
نحن في الأساس لا نستخدم هذه الطريقة ، لذلك لن نقدمها هنا.
تحديد ج للتأثير بعد ورم خبيث
1. صباغة الغراء
بعد التلوين باستخدام Coomassie باللون الأزرق اللامع وإزالة اللون باستخدام Destain ، تحقق مما إذا كان لا يزال هناك بروتين على الغراء ليعكس تأثير النقل.
2. فيلم صبغ
هناك نوعان من محاليل الصبغ ، قابلة للعكس ولا رجوع فيها.تشمل تلك القابلة للعكس أحمر ponceau-s ، و fastgreen FC ، و CPTs ، وما إلى ذلك بعد الصباغة بهذه الأصباغ ، يمكن غسل الصباغ بعيدًا ، ويمكن استخدام الغشاء لمزيد من التحليل.لكن الأصباغ التي لا رجعة فيها ، مثل Coomassie brilliant blue ، والحبر الهندي ، و amido Black 10B ، وما إلى ذلك ، ولا يمكن استخدام الفيلم الملون لمزيد من التحليل.
الوقت ما بعد: سبتمبر-09-2022
