使用分离胶
解决方案和常见问题：
1）滤纸、胶水、膜之间的大小一般为滤纸>=膜>=胶水。
2）滤纸、胶水和膜之间不能有气泡，否则会造成短路。
3) 由于膜的疏水性，膜必须首先在甲醇中完全润湿。此外，在后续操作中必须始终保持薄膜湿润（干膜法除外）。
4）滤纸可重复使用。上层滤纸（膜）吸附的转运蛋白较多，因此上下层滤纸不能混用。如果无法区分，可以更换橡胶滤纸。
5）转印时间一般为1.5小时，（1ma-2ma/cm2，10%凝胶），转印时间和电流可根据分子量进行调整。
1）覆膜、胶水和纸夹层时，在带有旋转胶片缓冲器的大盘中操作。叠好后，将三者平行传送至转膜装置。不要再动它们了，因为在buffer中操作已经完全消除了产生气泡的可能性，所以不需要再驱动气泡了
2）关于转膜时间：半干转20V×30min
(二)湿法
这种方法我们基本不用，这里就不介绍了。
C转移后效果鉴定
1、胶染
考马斯亮蓝染色，Destain脱色后，看胶水上是否还有蛋白，反映转印效果。
2、染膜
有两种染料溶液，可逆的和不可逆的。可逆的有丽春红、固绿FC、CPTs等，用这些染料染色后，色素可以洗掉，出膜可以做进一步分析。但不可逆染料，如考马斯亮蓝、印度墨水、氨基黑10B等，染色后的胶片不能用于进一步分析。
发布时间：Sep-09-2022
