VerwendenTrennkleber
Hinweise und häufige Probleme:
1) Die Größe zwischen Filterpapier, Kleber und Membran beträgt im Allgemeinen Filterpapier > = Membran > = Kleber.
2) Zwischen Filterpapier, Kleber und Membran dürfen sich keine Blasen befinden, die einen Kurzschluss verursachen könnten.
3) Aufgrund der Hydrophobie der Membran muss die Membran zunächst vollständig mit Methanol benetzt werden.Darüber hinaus muss die Folie im weiteren Arbeitsgang stets feucht gehalten werden (Ausnahme: Trockenfilmverfahren).
4) Das Filterpapier kann wiederverwendet werden.Im oberen Filterpapier (Membran) sind viele übertragene Proteine adsorbiert, daher dürfen das obere und untere Filterpapier nicht vermischt werden.Wenn sie nicht unterschieden werden können, kann das Gummifilterpapier ausgetauscht werden.
5) Die Übertragungszeit beträgt im Allgemeinen 1,5 Stunden (1 mA-2 mA / cm2, 10 % Gel), und die Übertragungszeit und der Strom können je nach Molekulargewicht angepasst werden.
1) Beim Laminieren von Folien-, Leim- und Papiersandwiches auf einer großen Platte mit rotierendem Folienpuffer arbeiten.Übertragen Sie die drei nach dem Stapeln parallel auf die rotierende Filmvorrichtung.Bewegen Sie sie nicht mehr, da die Möglichkeit einer Blasenbildung durch den Betrieb im Puffer vollständig eliminiert wurde und daher keine Notwendigkeit besteht, Blasen anzutreiben
2) Informationen zur Filmübertragungszeit: 20 V für halbtrockene Rotation × 30 Minuten
(b) Nassmethode
Da wir diese Methode grundsätzlich nicht verwenden, werden wir sie hier nicht vorstellen.
C Identifizierung der Wirkung nach Metastasierung
1. Leimfärben
Überprüfen Sie nach dem Färben mit Coomassie Brilliant Blue und dem Entfärben mit Destain, ob sich noch Proteine auf dem Kleber befinden, die den Übertragungseffekt widerspiegeln.
2. Färbefilm
Es gibt zwei Arten von Farbstofflösungen: reversible und irreversible.Zu den reversiblen gehören Ponceau-Rot, Fastgreen FC, CPTs usw. Nach dem Färben mit diesen Farbstoffen kann das Pigment abgewaschen und die Membran für weitere Analysen verwendet werden.Aber irreversible Farbstoffe wie Coomassie-Brillantblau, Tusche, Amidoschwarz 10B usw. und der gefärbte Film können nicht für die weitere Analyse verwendet werden.
Zeitpunkt der Veröffentlichung: 09.09.2022
