Қолданубөлгіш желім
шешімдер және жалпы мәселелер:
1) Сүзгі қағазы, желім және мембрана арасындағы өлшем әдетте сүзгі қағазы > = мембрана > = желім.
2) Сүзгі қағазы, желім және мембрана арасында қысқа тұйықталу тудыратын көпіршіктер болмауы керек.
3) Мембрананың гидрофобтылығына байланысты алдымен мембрананы метанолда толық сулау керек.Сонымен қатар, пленканы келесі операцияда (құрғақ пленка әдісін қоспағанда) барлық уақытта ылғалды ұстау керек.
4) Сүзгі қағазын қайта пайдалануға болады.Жоғарғы сүзгі қағазында (мембранада) адсорбцияланған көптеген тасымалданған ақуыздар бар, сондықтан жоғарғы және төменгі сүзгі қағаздарын араластыруға болмайды.Егер оларды ажырату мүмкін болмаса, резеңке сүзгі қағазын ауыстыруға болады.
5) Тасымалдау уақыты әдетте 1,5 сағатты құрайды (1ма-2ма / см2, 10% гель) және тасымалдау уақыты мен ток молекулалық салмаққа сәйкес реттелуі мүмкін.
1) Пленка, желім және қағаз бутербродтарын ламинаттау кезінде айналмалы пленка буфері бар үлкен пластинада жұмыс істеңіз.Жинақтаудан кейін үшеуін айналмалы пленка құрылғысына параллельді түрде тасымалдаңыз.Оларды енді жылжытпаңыз, себебі буферде жұмыс істеу арқылы көпіршіктердің пайда болу мүмкіндігі толығымен жойылды, сондықтан көпіршіктерді айдаудың қажеті жоқ.
2) Пленканы тасымалдау уақыты туралы: жартылай құрғақ айналу үшін 20 В × 30 мин
(b) ылғалды әдіс
Біз бұл әдісті негізінен қолданбаймыз, сондықтан оны мұнда енгізбейміз.
C метастаздан кейінгі әсерді анықтау
1. Желіммен бояу
Coomassie жарқыраған көк түспен бояғаннан кейін және Destain көмегімен түссіздендірілгеннен кейін, тасымалдау әсерін көрсету үшін желімде әлі де ақуыз бар-жоғын тексеріңіз.
2. Бояғыш пленка
Бояғыш ерітінділердің қайтымды және қайтымсыз екі түрі бар.Қайтымдыларға понсо қызыл, жылдам жасыл FC, CPTs және т.б., осы бояғыштармен бояғаннан кейін пигментті жууға болады, ал мембрананы одан әрі талдау үшін пайдалануға болады.Бірақ қайтымсыз бояғыштар, мысалы, Coomassie brilliant blue, India сиясы, amido Black 10B және т.б. және боялған пленканы әрі қарай талдау үшін пайдалану мүмкін емес.
Жіберу уақыты: 09 қыркүйек 2022 ж
