Користетесепарационен лепак
лекови и вообичаени проблеми:
1) Големината помеѓу филтер-хартијата, лепилото и мембраната е генерално филтер-хартија > = мембрана > = лепак.
2) Не смее да има меурчиња помеѓу филтер-хартијата, лепилото и мембраната, што ќе предизвика краток спој.
3) Поради хидрофобноста на мембраната, мембраната прво мора целосно да се навлажни во метанол.Покрај тоа, филмот мора постојано да се чува влажен во последователната работа (освен методот на сув филм).
4) Филтер-хартијата може повторно да се употреби.Има многу пренесени протеини адсорбирани во горната филтер-хартија (мембрана), така што горната и долната филтер-хартија не смеат да се мешаат.Ако не можат да се разликуваат, гумената филтер-хартија може да се замени.
5) Времето на пренос е генерално 1,5 часа, (1ma-2ma / cm2, 10% гел), а времето на пренос и струјата може да се прилагодат според молекуларната тежина.
1) Кога ламинирате сендвичи со филм, лепак и хартија, работете во голема плоча со ротирачки филмски пуфер.По редење, префрлете ги трите паралелно на уредот со ротирачки филм.Не ги поместувајте повеќе, бидејќи можноста за меурчиња е целосно елиминирана со работа во тампонот, така што нема потреба да се вози меурчиња
2) За времето на пренос на филмот: 20 V за полусуво ротирање × 30 мин
(б) влажен метод
Ние во основа не го користиме овој метод, па затоа нема да го воведеме овде.
C идентификација на ефектот по метастази
1. Боење со лепак
По боење со Coomassie брилијантно сино и обезбојување со Destain, проверете дали сè уште има протеин на лепилото за да го одрази ефектот на трансферот.
2. Боја филм
Постојат два вида раствори за боја, реверзибилни и неповратни.Реверзибилните вклучуваат црвено, брзозелено FC, CPT итн. по боење со овие бои, пигментот може да се измие, а мембраната може да се користи за понатамошна анализа.Но, неповратните бои, како што се Coomassie brilliant blue, India ink, amido Black 10B, итн., и обоениот филм не можат да се користат за понатамошна анализа.
Време на објавување: 09-09-2022 година
