Kullanmakayırma tutkalı
kullanımlar ve yaygın sorunlar:
1) Filtre kağıdı, yapıştırıcı ve membran arasındaki boyut genellikle filtre kağıdı> = membran> = yapıştırıcıdır.
2) Filtre kağıdı, yapıştırıcı ve membran arasında kısa devreye neden olacak kabarcıklar olmamalıdır.
3) Membranın hidrofobik özelliğinden dolayı öncelikle metanol ile tamamen ıslatılmalıdır.Ayrıca sonraki işlemde (kuru film yöntemi hariç) film sürekli ıslak tutulmalıdır.
4) Filtre kağıdı tekrar kullanılabilir.Üst filtre kağıdında (membran) adsorbe edilmiş birçok transfer protein vardır, bu nedenle üst ve alt filtre kağıtları karıştırılmamalıdır.Eğer ayırt edilemezlerse, kauçuk filtre kağıdı değiştirilebilir.
5) Transfer süresi genellikle 1,5 saattir (1ma-2ma/cm2, %10 jel) ve transfer süresi ve akımı moleküler ağırlığa göre ayarlanabilir.
1) Film, yapıştırıcı ve kağıt sandviçleri lamine ederken, dönen bir film tamponu olan büyük bir plaka içinde çalıştırın.İstiflendikten sonra üçünü paralel olarak dönen film cihazına aktarın.Artık onları hareket ettirmeyin, çünkü tamponda çalıştırılarak kabarcık olasılığı tamamen ortadan kaldırılmıştır, bu nedenle kabarcıkları sürmeye gerek yoktur.
2) Film aktarım süresi hakkında: Yarı kuru dönüş için 20 V × 30 dakika
(b) ıslak yöntem
Temelde bu yöntemi kullanmıyoruz, bu yüzden burada tanıtmayacağız.
C metastaz sonrası etkinin belirlenmesi
1. Tutkal boyama
Coomassie parlak mavi ile boyadıktan ve Destain ile renk giderdikten sonra, transferin etkisini yansıtmak için yapıştırıcı üzerinde hala protein olup olmadığına bakın.
2. Boya filmi
Tersinir ve tersinmez olmak üzere iki çeşit boya solüsyonu vardır.Geri dönüşümlü olanlar arasında ponceau-s red, fastgreen FC, CPT'ler vb. bulunur. Bu boyalarla boyamadan sonra pigment yıkanabilir ve membran daha fazla analiz için kullanılabilir.Ancak Coomassie parlak mavi, Hindistan mürekkebi, amido Black 10B vb. gibi tersinmez boyalar ve lekeli film daha fazla analiz için kullanılamaz.
Gönderim zamanı: Eylül-09-2022
