استفاده کنیدچسب جداسازی
کاربردها و مشکلات رایج:
1) اندازه بین کاغذ صافی، چسب و ممبران به طور کلی کاغذ فیلتر > = غشاء > = چسب است.
2) بین کاغذ صافی، چسب و غشا نباید حباب وجود داشته باشد که باعث اتصال کوتاه می شود.
3) به دلیل آبگریز بودن غشا، ابتدا باید غشا کاملاً در متانول خیس شود.علاوه بر این، فیلم باید همیشه در عملیات بعدی مرطوب نگه داشته شود (به جز روش فیلم خشک).
4) کاغذ صافی قابل استفاده مجدد است.پروتئین های انتقال یافته زیادی در کاغذ صافی بالایی (غشاء) جذب می شوند، بنابراین کاغذ صافی بالایی و پایینی نباید با هم مخلوط شوند.اگر نمی توان آنها را تشخیص داد، می توان کاغذ صافی لاستیکی را جایگزین کرد.
5) زمان انتقال به طور کلی 1.5 ساعت است، (1ma-2ma / cm2، ژل 10٪)، و زمان انتقال و جریان را می توان با توجه به وزن مولکولی تنظیم کرد.
1) هنگام لمینت کردن ساندویچ های فیلم، چسب و کاغذ، در یک صفحه بزرگ با بافر فیلم چرخان کار کنید.پس از انباشته شدن، این سه را به صورت موازی به دستگاه فیلم چرخان منتقل کنید.دیگر آنها را حرکت ندهید، زیرا با کار در بافر امکان ایجاد حباب کاملاً از بین رفته است، بنابراین نیازی به حرکت حباب نیست.
2) درباره زمان انتقال فیلم: 20 ولت برای چرخش نیمه خشک × 30 دقیقه
ب) روش مرطوب
ما اساسا از این روش استفاده نمی کنیم، بنابراین در اینجا آن را معرفی نمی کنیم.
C شناسایی اثر پس از متاستاز
1. رنگرزی با چسب
پس از رنگ آمیزی با Coomassie blue brilliant و رنگ زدایی با Destin، ببینید آیا هنوز پروتئین روی چسب وجود دارد تا اثر انتقال را منعکس کند.
2. فیلم رنگ
دو نوع محلول رنگ وجود دارد، برگشت پذیر و غیر قابل برگشت.موارد برگشت پذیر عبارتند از پونسو قرمز، FC سریع سبز، CPT و غیره پس از رنگرزی با این رنگ ها، رنگدانه را می توان شسته و از غشاء برای تجزیه و تحلیل بیشتر استفاده کرد.اما رنگ‌های برگشت‌ناپذیر مانند Coomassie brilliant blue، جوهر هند، آمیدو بلک 10B و غیره و فیلم لکه‌دار را نمی‌توان برای تجزیه و تحلیل بیشتر استفاده کرد.
زمان ارسال: سپتامبر-09-2022
