प्रयोग गर्नुहोस्विभाजन गोंद
उपयोगिता र सामान्य समस्याहरु:
1) फिल्टर पेपर, ग्लु र झिल्ली बीचको साइज सामान्यतया फिल्टर पेपर > = झिल्ली > = ग्लु हो।
2) फिल्टर पेपर, ग्लु र झिल्लीको बीचमा कुनै बबल हुनु हुँदैन, जसले सर्ट सर्किट निम्त्याउँछ।
3) झिल्लीको हाइड्रोफोबिसिटीको कारण, झिल्लीलाई पहिले मिथेनोलमा पूर्ण रूपमा भिजेको हुनुपर्छ।थप रूपमा, फिल्मलाई पछिको अपरेशनमा (सुक्खा फिल्म विधि बाहेक) सधैं भिजेको हुनुपर्छ।
4) फिल्टर पेपर पुन: प्रयोग गर्न सकिन्छ।त्यहाँ धेरै स्थानान्तरण प्रोटीनहरू माथिल्लो फिल्टर पेपर (झिल्ली) मा सोखिएका छन्, त्यसैले माथिल्लो र तल्लो फिल्टर पेपरहरू मिश्रित हुनु हुँदैन।यदि तिनीहरूलाई छुट्याउन सकिँदैन भने, रबर फिल्टर पेपर प्रतिस्थापन गर्न सकिन्छ।
5) स्थानान्तरण समय सामान्यतया 1.5 घण्टा, (1ma-2ma / cm2, 10% जेल), र स्थानान्तरण समय र वर्तमान आणविक वजन अनुसार समायोजित गर्न सकिन्छ।
1) फिल्म, ग्लु र पेपर स्यान्डविच ल्यामिनेट गर्दा, घुमाउने फिल्म बफरको साथ ठूलो प्लेटमा सञ्चालन गर्नुहोस्।स्ट्याकिङ पछि, समानान्तर घुमाउने फिल्म उपकरणमा तीन स्थानान्तरण गर्नुहोस्।तिनीहरूलाई थप सार्न नदिनुहोस्, किनकि बफरमा सञ्चालन गरेर बुलबुलेको सम्भावना पूर्ण रूपमा हटाइएको छ, त्यसैले त्यहाँ बुलबुले चलाउन आवश्यक छैन।
2) चलचित्र स्थानान्तरण समय बारे: अर्ध सुक्खा रोटेशन × 30 मिनेट को लागी 20 V
(b) गीला विधि
हामी मूलतः यो विधि प्रयोग गर्दैनौं, त्यसैले हामी यसलाई यहाँ प्रस्तुत गर्दैनौं।
सी मेटास्टेसिस पछि प्रभाव को पहिचान
1. गोंद रंगाई
Coomassie ब्रिलियन्ट नीलोसँग दाग लगाएपछि र Destain सँग डिकोलोराइज गरिसकेपछि, स्थानान्तरणको प्रभावलाई प्रतिबिम्बित गर्न ग्लुमा अझै प्रोटीन छ कि छैन हेर्नुहोस्।
2. डाई फिल्म
त्यहाँ दुई प्रकारका डाई समाधानहरू छन्, उल्टाउन मिल्ने र अपरिवर्तनीय।उल्टाउन मिल्नेहरूमा पोन्साउ-एस रातो, फास्टग्रीन एफसी, सीपीटीहरू, इत्यादि समावेश छन्। यी रङहरूसँग रङ्ग गरेपछि, रङलाई धोइन्छ, र झिल्लीलाई थप विश्लेषणको लागि प्रयोग गर्न सकिन्छ।तर अपरिवर्तनीय रंगहरू, जस्तै Coomassie brilliant blue, India ink, amido Black 10B, आदि, र दाग भएको फिल्म थप विश्लेषणको लागि प्रयोग गर्न सकिँदैन।
पोस्ट समय: सेप्टेम्बर-09-2022
