Kasutaeraldusliim
olukorrad ja levinud probleemid:
1) Filterpaberi, liimi ja membraani vaheline suurus on üldiselt filterpaber> = membraan> = liim.
2) Filterpaberi, liimi ja membraani vahel ei tohi olla mullid, mis võivad põhjustada lühise.
3) Membraani hüdrofoobsuse tõttu tuleb membraan kõigepealt metanoolis täielikult märjaks teha.Lisaks tuleb kilet hoida kogu aeg märjana ka järgneval toimingul (v.a kuivkile meetod).
4) Filterpaberit saab uuesti kasutada.Ülemises filterpaberis (membraanis) on adsorbeerunud palju ülekantud valke, mistõttu ei tohi ülemist ja alumist filterpaberit omavahel segada.Kui neid ei ole võimalik eristada, võib kummist filterpaberi välja vahetada.
5) Ülekandeaeg on üldiselt 1,5 tundi (1ma-2ma / cm2, 10% geel) ning ülekandeaega ja voolu saab reguleerida vastavalt molekulmassile.
1) Kile-, liimi- ja paberivõileibade lamineerimisel tegutsege suurel plaadil koos pöörleva kilepuhvriga.Pärast virnastamist viige kolm paralleelselt pöörlevasse kileseadmesse.Ärge neid enam liigutage, sest mullide tekkimise võimalus on puhvris töötades täielikult välistatud, seega pole vaja mullid ajada
2) Filmi ülekandeaeg: 20 V poolkuiv pöörlemine × 30 min
b) märgmeetod
Põhimõtteliselt me seda meetodit ei kasuta, seega me seda siin ei tutvusta.
C toime tuvastamine pärast metastaase
1. Liimiga värvimine
Pärast Coomassie briljantsinise värvimist ja Destainiga värvi eemaldamist vaadake, kas liimil on veel valku, mis peegeldab ülekande mõju.
2. Värvikile
Värvilahuseid on kahte tüüpi, pöörduvad ja pöördumatud.Pööratavateks on näiteks ponceau-s red, fastgreen FC, CPT-d jne pärast nende värvidega värvimist saab pigmendi maha pesta ja membraani saab edasiseks analüüsiks kasutada.Kuid pöördumatuid värvaineid, nagu Coomassie briljantsinine, India tint, amido Black 10B jne, ja määrdunud kilet ei saa edasiseks analüüsiks kasutada.
Postitusaeg: 09.09.2022
