使用分離接着剤
使用法と一般的な問題:
1) 濾紙、接着剤、膜の間のサイズは、一般に濾紙 > = 膜 > = 接着剤です。
2) 濾紙、接着剤、膜の間に気泡があってはなりません。気泡がショートの原因となります。
3) メンブレンは疎水性であるため、最初にメンブレンをメタノールで完全に濡らす必要があります。また、その後の作業ではフィルムを常に湿った状態に保つ必要があります（ドライフィルム法を除く）。
4) 濾紙は再利用可能です。上濾紙（膜）には移送されたタンパク質が多く吸着しているので、上下の濾紙を混合しないでください。区別できない場合はゴムろ紙を交換してください。
5) 転写時間は通常 1.5 時間 (1ma ～ 2ma / cm2、10% ゲル) で、分子量に応じて転写時間と電流を調整できます。
1) フィルム、接着剤、紙のサンドイッチをラミネートする場合は、回転フィルム バッファーを備えた大きなプレートで作業します。積層後、3枚を回転フィルム装置に並行して移送します。バッファ内での動作により気泡の可能性が完全に排除されているため、これ以上動かさないでください。気泡を駆動する必要はありません。
2) フィルム転写時間について：20V セミドライ回転×30min
(b) 湿式法
基本的にこの方法は使用しませんので、ここでは紹介しません。
C 転移後の影響の特定
1.糊染め
クーマシー ブリリアント ブルーで染色し、脱色剤で脱色した後、転写の影響を反映するタンパク質が接着剤上に残っているかどうかを確認します。
2. 色素膜
染料溶液には可逆性と不可逆性の 2 種類があります。可逆的なものには、ポンソーレッド、ファストグリーン FC、CPT などがあり、これらの染料で染色した後、色素を洗い流し、膜をさらなる分析に使用できます。ただし、クーマシー ブリリアント ブルー、墨汁、アミド ブラック 10B などの不可逆染料や染色されたフィルムは、さらなる分析には使用できません。
投稿時間: 2022 年 9 月 9 日
