להשתמשדבק הפרדה
פעולות ובעיות נפוצות:
1) הגודל בין נייר סינון, דבק וממברנה הוא בדרך כלל נייר סינון > = ממברנה > = דבק.
2) אסור שיהיו בועות בין נייר הסינון, הדבק והממברנה שיגרמו לקצר חשמלי.
3) בגלל ההידרופוביות של הממברנה, יש להרטיב את הממברנה תחילה לחלוטין במתנול.בנוסף, יש לשמור את הסרט רטוב כל הזמן בפעולה שלאחר מכן (למעט שיטת הסרט היבש).
4) ניתן לעשות שימוש חוזר בנייר הסינון.ישנם חלבונים מועברים רבים הנספגים בנייר הסינון העליון (הממברנה), ולכן אסור לערבב את ניירות הסינון העליון והתחתון.אם לא ניתן להבחין ביניהם, ניתן להחליף את נייר הסינון הגומי.
5) זמן ההעברה הוא בדרך כלל 1.5 שעות, (1ma-2ma / cm2, 10% ג'ל), וניתן להתאים את זמן ההעברה והזרם בהתאם למשקל המולקולרי.
1) כאשר כריכים למינציה של סרט, דבק ונייר, פעלו בצלחת גדולה עם חיץ סרט מסתובב.לאחר הערימה, העבירו את השלושה למכשיר הסרט המסתובב במקביל.אין להזיז אותם יותר, כי האפשרות לבועות בוטלה לחלוטין על ידי הפעלה במאגר, כך שאין צורך להניע בועות
2) על זמן העברת הסרט: 20 V עבור סיבוב יבש למחצה × 30 דקות
(ב) שיטה רטובה
אנחנו בעצם לא משתמשים בשיטה הזו, אז לא נציג אותה כאן.
C זיהוי ההשפעה לאחר גרורות
1. צביעת דבק
לאחר צביעה בכחול מבריק Coomassie והפחתת צבע עם Destain, בדוק אם יש עדיין חלבון על הדבק כדי לשקף את השפעת ההעברה.
2. סרט צבע
ישנם שני סוגים של תמיסות צבע, הפיך ובלתי הפיך.הפיכים כוללים ponceau-s red, fastgreen FC, CPTs וכו'. לאחר צביעה עם צבעים אלה, ניתן לשטוף את הפיגמנט, וניתן להשתמש בממברנה לניתוח נוסף.אך לא ניתן להשתמש בצבעים בלתי הפיכים, כגון כחול מבריק, Coomassie brilliant, אינדיו, amido Black 10B וכו', והסרט המוכתם לניתוח נוסף.
זמן פרסום: 09-09-2022
