Használatelválasztó ragasztó
problémák és gyakori problémák:
1) A szűrőpapír, a ragasztó és a membrán közötti méret általában szűrőpapír > = membrán > = ragasztó.
2) A szűrőpapír, a ragasztó és a membrán között nem lehetnek buborékok, amelyek rövidzárlatot okozhatnak.
3) A membrán hidrofóbsága miatt a membránt először teljesen meg kell nedvesíteni metanolban.Ezenkívül a fóliát a következő művelet során mindig nedvesen kell tartani (kivéve a száraz fóliás módszert).
4) A szűrőpapír újra felhasználható.A felső szűrőpapírban (membránban) sok átvitt fehérje van adszorbeálva, ezért a felső és az alsó szűrőpapírt nem szabad keverni.Ha ezeket nem lehet megkülönböztetni, a gumi szűrőpapír cserélhető.
5) Az átviteli idő általában 1,5 óra (1ma-2ma / cm2, 10% gél), és az átviteli idő és az áramerősség a molekulatömeg szerint állítható.
1) Film-, ragasztó- és papírszendvicsek laminálásakor nagy tányérban dolgozzon forgó fóliapufferrel.A halmozás után a hármat párhuzamosan vigye át a forgó fóliaeszközre.Ne mozgassa tovább őket, mert a buborékok kialakulásának lehetősége teljesen megszűnt a pufferben való működéssel, így nem kell buborékokat vezetni
2) A filmátviteli időről: 20 V félszáraz forgásnál × 30 perc
b) nedves módszer
Alapvetően nem alkalmazzuk ezt a módszert, ezért itt nem mutatjuk be.
C hatás azonosítása metasztázis után
1. Ragasztófestés
Coomassie briliánskékkel való festés és Destain színtelenítés után ellenőrizze, hogy van-e még fehérje a ragasztón, ami tükrözi az átvitel hatását.
2. Festékfilm
Kétféle festékoldat létezik, reverzibilis és irreverzibilis.A reverzibilisek közé tartozik a ponceau-s red, a fastgreen FC, a CPT-k stb., miután ezekkel a festékekkel festették, a pigment lemosható, a membrán pedig további elemzésekhez használható.De az irreverzibilis színezékek, mint például a Coomassie briliánskék, az India tinta, az amido Black 10B stb., és a festett film nem használhatók további elemzésekhez.
Feladás időpontja: 2022.09.09
