Përdorningjitës ndarës
shërbimet dhe problemet e zakonshme:
1) Madhësia midis letrës filtri, ngjitësit dhe membranës është përgjithësisht letër filtri > = membranë > = ngjitës.
2) Nuk duhet të ketë flluska ndërmjet letrës filtri, ngjitësit dhe membranës, të cilat do të shkaktojnë qark të shkurtër.
3) Për shkak të hidrofobisë së membranës, fillimisht membrana duhet të laget plotësisht në metanol.Përveç kësaj, filmi duhet të mbahet i lagësht gjatë gjithë kohës në funksionimin e mëpasshëm (përveç metodës së filmit të thatë).
4) Letra filtri mund të ripërdoret.Ka shumë proteina të transferuara të absorbuara në letrën e sipërme të filtrit (membranën), kështu që letrat e sipërme dhe të poshtme të filtrit nuk duhet të përzihen.Nëse nuk mund të dallohen, letra e filtrit të gomës mund të zëvendësohet.
5) Koha e transferimit është përgjithësisht 1.5 orë, (1ma-2ma / cm2, 10% xhel), dhe koha e transferimit dhe rryma mund të rregullohen sipas peshës molekulare.
1) Kur laminoni sanduiçe me film, ngjitës dhe letër, veproni në një pjatë të madhe me një tampon rrotullues filmi.Pas grumbullimit, transferoni të treja në pajisjen e filmit rrotullues paralelisht.Mos i lëvizni më, sepse mundësia e flluskave është eliminuar plotësisht duke operuar në tampon, kështu që nuk ka nevojë të lëvizni flluska
2) Rreth kohës së transferimit të filmit: 20 V për rrotullim gjysmë të thatë × 30 min
(b) metodë e lagësht
Ne në thelb nuk e përdorim këtë metodë, kështu që nuk do ta prezantojmë këtu.
C identifikimi i efektit pas metastazës
1. Ngjyrosje me ngjitës
Pas ngjyrosjes me Coomassie blu brilliant dhe çngjyrosjes me Destain, shikoni nëse ka ende proteinë në ngjitës për të pasqyruar efektin e transferimit.
2. Film ngjyrues
Ekzistojnë dy lloje të tretësirave të ngjyrave, të kthyeshme dhe të pakthyeshme.Ato të kthyeshme përfshijnë të kuqe ponceau, FC me gjelbërim të shpejtë, CPT, etj. pas ngjyrosjes me këto ngjyra, pigmenti mund të lahet dhe membrana mund të përdoret për analiza të mëtejshme.Por ngjyrat e pakthyeshme, të tilla si Coomassie brilliant blue, ink india, amido Black 10B, etj., dhe filmi i njollosur nuk mund të përdoren për analiza të mëtejshme.
Koha e postimit: Shtator-09-2022
