Sử dụngkeo tách
giải pháp và các vấn đề phổ biến:
1) Kích thước giữa giấy lọc, keo và màng thường là giấy lọc > = màng > = keo.
2) Không được có bong bóng giữa giấy lọc, keo và màng, điều này sẽ gây đoản mạch.
3) Do tính kỵ nước của màng nên trước tiên màng phải được làm ướt hoàn toàn trong metanol.Ngoài ra, phim phải luôn được giữ ẩm trong lần vận hành tiếp theo (ngoại trừ phương pháp phim khô).
4) Giấy lọc có thể được tái sử dụng.Có nhiều protein chuyển được hấp phụ trong giấy lọc trên (màng), vì vậy không được trộn lẫn giấy lọc trên và giấy lọc dưới.Nếu không phân biệt được thì có thể thay giấy lọc cao su.
5) Thời gian truyền thường là 1,5 giờ, (1ma-2ma / cm2, 10% gel) và thời gian truyền và dòng điện có thể được điều chỉnh theo trọng lượng phân tử.
1) Khi ép màng, keo và bánh mì giấy, hãy thao tác trên một tấm lớn với bộ đệm phim quay.Sau khi xếp chồng, chuyển song song cả ba sang thiết bị quay phim.Không di chuyển chúng nữa, vì khả năng bong bóng đã được loại bỏ hoàn toàn bằng cách vận hành trong bộ đệm, do đó không cần phải điều khiển bong bóng
2) Về thời gian truyền phim: 20 V đối với quay bán khô × 30 phút
(b) phương pháp ướt
Về cơ bản chúng tôi không sử dụng phương pháp này, vì vậy chúng tôi sẽ không giới thiệu nó ở đây.
C xác định hiệu quả sau khi di căn
1. Nhuộm keo
Sau khi nhuộm bằng Coomassie Brilliant Blue và khử màu bằng Destain, hãy xem liệu có còn protein trên keo để phản ánh hiệu quả của quá trình chuyển màu hay không.
2. Phim nhuộm
Có hai loại dung dịch thuốc nhuộm, có thể đảo ngược và không thể đảo ngược.Những chất có thể đảo ngược bao gồm ponceau-s red, fastgreen FC, CPTs, v.v. sau khi nhuộm bằng những thuốc nhuộm này, sắc tố có thể được rửa sạch và màng có thể được sử dụng để phân tích thêm.Nhưng thuốc nhuộm không thể đảo ngược, chẳng hạn như Coomassie rực rỡ xanh, mực Ấn Độ, amido Black 10B, v.v., và phim nhuộm màu không thể được sử dụng để phân tích thêm.
Thời gian đăng: 09-09-2022
