Gamitinpandikit ng paghihiwalay
mga problema at karaniwang problema:
1) Ang laki sa pagitan ng filter na papel, pandikit at lamad ay karaniwang filter na papel > = lamad > = pandikit.
2) Dapat na walang mga bula sa pagitan ng filter na papel, pandikit at lamad, na magdudulot ng short circuit.
3) Dahil sa hydrophobicity ng lamad, ang lamad ay dapat munang ganap na mabasa sa methanol.Bilang karagdagan, ang pelikula ay dapat na panatilihing basa sa lahat ng oras sa kasunod na operasyon (maliban sa paraan ng dry film).
4) Ang filter na papel ay maaaring gamitin muli.Mayroong maraming mga inilipat na protina na na-adsorbed sa itaas na filter na papel (membrane), kaya ang upper at lower filter paper ay hindi dapat paghaluin.Kung hindi sila makilala, maaaring mapalitan ang goma na filter na papel.
5) Ang oras ng paglipat ay karaniwang 1.5 oras, (1ma-2ma / cm2, 10% gel), at ang oras ng paglipat at kasalukuyang maaaring iakma ayon sa timbang ng molekular.
1) Kapag laminating film, pandikit at papel sandwich, gumana sa isang malaking plato na may umiikot na film buffer.Pagkatapos ng stacking, ilipat ang tatlo sa umiikot na aparato ng pelikula nang magkatulad.Huwag nang ilipat ang mga ito, dahil ang posibilidad ng mga bula ay ganap na naalis sa pamamagitan ng pagpapatakbo sa buffer, kaya hindi na kailangang magmaneho ng mga bula.
2) Tungkol sa oras ng paglipat ng pelikula: 20 V para sa semi dry rotation × 30min
(b) wet method
Karaniwang hindi namin ginagamit ang pamamaraang ito, kaya hindi namin ito ipakilala dito.
C pagkilala sa epekto pagkatapos ng metastasis
1. Pagtitina ng pandikit
Pagkatapos ng paglamlam ng Coomassie brilliant blue at pag-decolorize ng Destain, tingnan kung may protina pa sa pandikit upang ipakita ang epekto ng paglipat.
2. Pangkulay na pelikula
Mayroong dalawang uri ng mga solusyon sa pangulay, nababaligtad at hindi maibabalik.Kasama sa mga nababaligtad ang ponceau-s red, fastgreen FC, CPT, atbp. pagkatapos ng pagtitina gamit ang mga tina na ito, ang pigment ay maaaring hugasan, at ang lamad ay maaaring gamitin para sa karagdagang pagsusuri.Ngunit ang mga hindi maibabalik na tina, tulad ng Coomassie brilliant blue, India ink, amido Black 10B, atbp., at ang stained film ay hindi magagamit para sa karagdagang pagsusuri.
Oras ng post: Set-09-2022
